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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 抗菌肽与荧光蛋白EGFP融合，要不要加linker，如果要加，加什么样的linker？
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I-Believe

新虫 (小有名气)

[交流] 抗菌肽与荧光蛋白EGFP融合，要不要加linker，如果要加，加什么样的linker？ 已有5人参与

各位前辈，我做抗菌肽的研究。前段时间求助荧光蛋白质粒没求助到，现在决定自己构建。
我的目的抗菌肽155个AA，EGFP239个AA。融合两个基因进行大肠杆菌表达
我现在已经设计了引物没有linker，后来看到加linker有助于保持目的蛋白活性。
想请教大家是否需要加linker，加什么linker？

本来想发求助贴，无奈只有1.5个金币
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1楼 2015-04-25 10:43:55
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wanglele87

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-25 23:25:57
一般GSGSGSGSGS这样比较多。或者全G或者全A也可以

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一生不羁放纵爱自由
2楼2015-04-25 11:04:59
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1993云崖

木虫 (小有名气)
查找文献，我们用的是G4S3的linker,成功连接三个基因，并且可溶性表达。

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暮雪千山，厚积薄发
3楼2015-10-20 23:29:20
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赵鑫易

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
大概记得linker可加可不加，好像是为了调节两个蛋白之间的空间位置
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4楼2015-10-20 23:51:32
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siriusxuan

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
常用GGGGS，一个或者两三个的都有。
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此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
5楼2015-10-21 11:02:49
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败走费城

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
抗菌肽一端加了荧光标记后会不会影响它的抗菌活性吗？我也想做抗菌肽杀菌的作用机理，看了一些这方面的文献，担心自己通过原核生物的超表达合成的抗菌肽并不能正确折叠形成有杀菌活性的抗菌肽，否则抗菌肽为什么很难通过这种方式大规模生产。本人小硕一枚，很多不懂，望赐教。

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6楼2015-10-23 22:58:40
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