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财迷财谜

新虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝

我把豆子磨成粉后,加入木瓜蛋白酶进行酶解处理,然后离心,用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。结果发现加入酶进行酶解后,蛋白含量不如未进行酶解处理的。不知道为啥啊,恳请大家帮助。
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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8楼: Originally posted by 财迷财谜 at 2015-05-03 23:00:25
蒸馏水。
我按着文献写溶解后还加热灭酶后再酶解的。而且是否酶解也做了对照,但是测出的结果就是没有酶解的,蛋白含量要高于酶解后的。...

如果只是水的话,溶解不了那么多蛋白质吧。这种情况能不能重现?
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
9楼2015-05-04 11:13:31
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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因为蛋白质被酶水解了,所以含量下降了。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
2楼2015-04-23 20:07:44
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财迷财谜

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-23 20:07:44
因为蛋白质被酶水解了,所以含量下降了。

我测的是上清液的的蛋白含量啊,蛋白水解之后应该是可溶性蛋白含量增大了啊。
3楼2015-04-28 11:39:22
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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3楼: Originally posted by 财迷财谜 at 2015-04-28 11:39:22
我测的是上清液的的蛋白含量啊,蛋白水解之后应该是可溶性蛋白含量增大了啊。...

如果我没记错,考马斯亮蓝是和蛋白质中特定的几种氨基酸结合,可能不同的蛋白质会有不同的响应。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
4楼2015-04-28 12:01:23
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财迷财谜

新虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-28 12:01:23
如果我没记错,考马斯亮蓝是和蛋白质中特定的几种氨基酸结合,可能不同的蛋白质会有不同的响应。...

是这样的,不过我用凯氏定氮测定了一下含量,也是减少了,我们分析的是豆子中的蛋白完全溶解了,没有不溶的成分。
5楼2015-04-30 12:54:48
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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5楼: Originally posted by 财迷财谜 at 2015-04-30 12:54:48
是这样的,不过我用凯氏定氮测定了一下含量,也是减少了,我们分析的是豆子中的蛋白完全溶解了,没有不溶的成分。...

你的豆子磨成粉之后用什么溶解的?
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
6楼2015-04-30 13:31:34
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财迷财谜

新虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-30 13:31:34
你的豆子磨成粉之后用什么溶解的?...

蒸馏水。我按照文献写的,酶解之前还加热灭酶了一下。之后也是酶解的和没有酶解的还做了平行,测出的结果就是不太对。
7楼2015-05-03 22:58:52
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财迷财谜

新虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-30 13:31:34
你的豆子磨成粉之后用什么溶解的?...

蒸馏水。
我按着文献写溶解后还加热灭酶后再酶解的。而且是否酶解也做了对照,但是测出的结果就是没有酶解的,蛋白含量要高于酶解后的。
8楼2015-05-03 23:00:25
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财迷财谜

新虫 (小有名气)

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9楼: Originally posted by archbishop at 2015-05-04 11:13:31
如果只是水的话,溶解不了那么多蛋白质吧。这种情况能不能重现?...

如果说溶解不了这么多蛋白质,那我把蛋白水解后,可溶性蛋白含量应该上升啊,那么测上清液里的可溶性蛋白含量应该提高啊。可是两种蛋白的含量没有变化。
重现性的话,应该是可以的,每次测定结果都差不多的。
话说怎么把金币给您。
10楼2015-05-04 19:10:52
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