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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 其他分析 » 考马斯亮蓝
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财迷财谜

新虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝

我把豆子磨成粉后，加入木瓜蛋白酶进行酶解处理，然后离心，用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。结果发现加入酶进行酶解后，蛋白含量不如未进行酶解处理的。不知道为啥啊，恳请大家帮助。
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1楼 2015-04-23 19:57:03
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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8楼: Originally posted by 财迷财谜 at 2015-05-03 23:00:25
蒸馏水。
我按着文献写溶解后还加热灭酶后再酶解的。而且是否酶解也做了对照，但是测出的结果就是没有酶解的，蛋白含量要高于酶解后的。...

如果只是水的话，溶解不了那么多蛋白质吧。这种情况能不能重现？
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
9楼2015-05-04 11:13:31
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
因为蛋白质被酶水解了，所以含量下降了。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-04-23 20:07:44
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财迷财谜

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-23 20:07:44
因为蛋白质被酶水解了，所以含量下降了。

我测的是上清液的的蛋白含量啊，蛋白水解之后应该是可溶性蛋白含量增大了啊。
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3楼2015-04-28 11:39:22
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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3楼: Originally posted by 财迷财谜 at 2015-04-28 11:39:22
我测的是上清液的的蛋白含量啊，蛋白水解之后应该是可溶性蛋白含量增大了啊。...

如果我没记错，考马斯亮蓝是和蛋白质中特定的几种氨基酸结合，可能不同的蛋白质会有不同的响应。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
4楼2015-04-28 12:01:23
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财迷财谜

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-28 12:01:23
如果我没记错，考马斯亮蓝是和蛋白质中特定的几种氨基酸结合，可能不同的蛋白质会有不同的响应。...

是这样的，不过我用凯氏定氮测定了一下含量，也是减少了，我们分析的是豆子中的蛋白完全溶解了，没有不溶的成分。
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5楼2015-04-30 12:54:48
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archbishop

禁虫 (职业作家)

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5楼: Originally posted by 财迷财谜 at 2015-04-30 12:54:48
是这样的，不过我用凯氏定氮测定了一下含量，也是减少了，我们分析的是豆子中的蛋白完全溶解了，没有不溶的成分。...

你的豆子磨成粉之后用什么溶解的？
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
6楼2015-04-30 13:31:34
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财迷财谜

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-30 13:31:34
你的豆子磨成粉之后用什么溶解的？...

蒸馏水。我按照文献写的，酶解之前还加热灭酶了一下。之后也是酶解的和没有酶解的还做了平行，测出的结果就是不太对。
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7楼2015-05-03 22:58:52
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财迷财谜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-30 13:31:34
你的豆子磨成粉之后用什么溶解的？...

蒸馏水。
我按着文献写溶解后还加热灭酶后再酶解的。而且是否酶解也做了对照，但是测出的结果就是没有酶解的，蛋白含量要高于酶解后的。
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8楼2015-05-03 23:00:25
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财迷财谜

新虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by archbishop at 2015-05-04 11:13:31
如果只是水的话，溶解不了那么多蛋白质吧。这种情况能不能重现？...

如果说溶解不了这么多蛋白质，那我把蛋白水解后，可溶性蛋白含量应该上升啊，那么测上清液里的可溶性蛋白含量应该提高啊。可是两种蛋白的含量没有变化。
重现性的话，应该是可以的，每次测定结果都差不多的。
话说怎么把金币给您。
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10楼2015-05-04 19:10:52
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