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大明子么么哒

新虫 (初入文坛)

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[求助] 细菌基因敲除的小伙伴看过来

我在第二次同源重组后，挑出了13个单菌落，摇菌后，提基因组用左同源臂的上游引物和右同源臂的下游引物，PCR发现有8个菌P出了缺失500碱基的条带，5个菌落P出了正常大小的条带，以为敲除成功了，进一步用缺失片段的引物进行PCR，结果8个菌落P出了500左右的条带还有好几条杂带，用出发菌株和恢复菌株做对照,P出了单一的500左右的条带，想问问大家这是什么原因？是成功了还是失败了，后面应该怎么验证呢

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1楼 2015-04-22 23:51:49

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