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pxxfntrt

木虫 (小有名气)

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[交流] 琼脂糖凝胶怎么才能跑得好看一些呢？

在做化合物对TopoI抑制活性的测定，DNA是pBR322，目前的结果：

1×TAE中120V跑了50min（第一张35min），再用EB染色，条带都出现这样的扭曲，是我加样的问题，还是胶的问题？或者电泳条件不适合？
求教~~~

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1楼 2015-04-16 14:55:10

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引用回帖:

10楼: Originally posted by luwei13566 at 2015-04-21 13:25:18
前两张图不是胶和电泳buffer的问题，你的marker还是非常清晰的，问题出在你样品本身，特别是第一张图你X点样孔质粒跑成那个样子很有问题，你的质粒是怎么提的手提还是试剂盒？loading buffer有问题没有？点样的时候 ...

点样时候就对准加样孔的中间，一点点加进去，我确实怀疑自己加样没加好，但查了很多文献都没对点样有什么要求，关注点都在胶、Buffer和点泳条件上。
点样要均匀的话有什么要注意的吗？
120V确实高了，最近用1000V跑了一次，marker没问题，样品条带的变形稍有减小，但应该不是主要原因，可能得重配TAE了。