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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 最近在做crispr，请问大家能否告知sgRNA怎么合成还是转录得到
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zhengxianrui

新虫 (小有名气)
你好！请问你做crispr做到哪里了？靶位点是怎么选择的，设计sgRNA怎么设计的？我也是新手，还望多传授经验啊
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希望一切顺利
11楼2015-04-29 16:08:20
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hkl4747

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 我是丫丫 at 2015-04-24 09:58:19
traceRNA的这个序列怎么得到？sgRNA的20bp可以根据目标序列得到，那traceRNA呢，求解答...

请问答案是什么呢？
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12楼2016-03-09 15:26:39
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梦幻Q仔

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by pypsak at 2015-04-23 08:56:48
有两种方法：1，体外转录sgRNA+ tracrRNA，然后跟cas9蛋白同转化细菌；2，是构建适合你得菌的敲除质粒，主要是启动子这块需要考虑，但是质粒进去了你得考虑到质粒会一直存在细菌中。...

sgRNA ??不是crRNA 吗？？，guide RNA（有20个左右碱基与目的基因相同），我也是看到的
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Try every moment!!
13楼2016-03-23 11:22:19
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