应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 最近在做crispr，请问大家能否告知sgRNA怎么合成还是转录得到
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 4037  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

我是丫丫

木虫 (正式写手)

[求助] 最近在做crispr，请问大家能否告知sgRNA怎么合成还是转录得到 已有4人参与

请问大家能否告知sgRNA怎么合成还是转录得到，另外在原核生物中能做吗？特异性序列多长？还有CRISPR-Cas9表达载体是买的还是自己构建的？刚接触这个课题，不懂，求大神讲解
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
一颗自由的心不知是被身体束缚还是梦想
1楼 2015-04-14 09:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是丫丫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pypsak at 2015-04-15 13:31:43
酶切位点+20bp长度，原核可以做，不知道你做的是什么菌，要看看转化效率

原核生物，你们的sgRNA怎么得到的？转录得到还是通过质粒进行p出来？
赞一下 回复此楼
一颗自由的心不知是被身体束缚还是梦想
6楼2015-04-22 15:00:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

maiduo

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你cre loxp不做了？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-04-14 14:06:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是丫丫

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by maiduo at 2015-04-14 14:06:30
你cre loxp不做了？

？？
回复此楼
一颗自由的心不知是被身体束缚还是梦想
3楼2015-04-14 18:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
我是丫丫(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-04-29 18:41:51
sgRNA 是可以在合成引物的公司合成单链带上酶切位点，通过随机退火制备成带酶切位点的小片段再连接到载体上，然后再买一个相关的cas9质粒就可以了。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-14 21:46:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-29 8/400 2026-03-29 23:53 by 我是小康
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +10 leaflight 2026-03-24 10/500 2026-03-29 20:58 by goldfish51
[考研] 各位老师好，我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +9 Koxui 2026-03-28 9/450 2026-03-29 20:43 by 无际的草原
[考研] 289求调剂 +5 BrightLL 2026-03-29 5/250 2026-03-29 17:24 by zhyzzh
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂 +8 举个栗子oi 2026-03-24 9/450 2026-03-29 13:08 by peike
[考研] 材料学硕333求调剂 +11 北道巷 2026-03-24 11/550 2026-03-29 08:31 by fmesaito
[考研] 322求调剂 +7 宋明欣 2026-03-27 7/350 2026-03-28 21:27 by sanrepian
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕，293，求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 320分，材料与化工专业，求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 311求调剂 +9 lin0039 2026-03-26 9/450 2026-03-28 13:05 by 唐沐儿
[考研] 0703化学求调剂，各位老师看看我！！！ +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭