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风轻快乐

新虫 (小有名气)

[求助] 黄酮类物质的提纯已有2人参与

我用芦丁做为标准品。在紫外分光光度计下测定510nm下有最大吸收波长,单提取到的总黄酮样品在NaNO2溶液0.4ml,混匀,放置6min,然后加入0.4ml10%的Al(NO3)3溶液,摇匀,放置6min,再分别加入4%的NaOH溶液4ml15分钟后并不显橙红色,貌似是褐色,全波长扫面时在最大吸收波长范围较宽,且在510处并没有最大吸收,这种现象正常吗?万分着急,谢谢!
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ccllcc4

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
黄酮提取出来本来就是个大杂烩,说的是分部提取但还是不纯,吸收波长不一样太正常了

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希望各位大神多多指教。。。。
2楼2015-04-13 12:35:13
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果是按照药典的操作来,你就别管总黄酮的最大吸收在哪,测就完了。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
3楼2015-04-13 12:49:52
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风轻快乐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ccllcc4 at 2015-04-13 12:35:13
黄酮提取出来本来就是个大杂烩,说的是分部提取但还是不纯,吸收波长不一样太正常了

那为什么要用芦丁做标准品?最大吸收波长不一样那测定结果不就不准确了吗?
4楼2015-04-13 14:50:17
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风轻快乐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2015-04-13 12:49:52
如果是按照药典的操作来,你就别管总黄酮的最大吸收在哪,测就完了。

那为什么要用芦丁做标准品?最大吸收波长不一样那测定结果不就不准确了吗?
5楼2015-04-13 14:51:40
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

引用回帖:
5楼: Originally posted by 风轻快乐 at 2015-04-13 14:51:40
那为什么要用芦丁做标准品?最大吸收波长不一样那测定结果不就不准确了吗?...

芦丁的结构适合于显色剂反应。另外,这种方法本来就不准确。只能说是个不是办法的办法。所以说你就别管,按照药典的要求测就完事,测定多少含量就是多少含量。等你做多糖含量测定的时候,还会碰到同样的问题。这里一并给你解答了。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
6楼2015-04-13 15:26:14
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ccllcc4

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
风轻快乐: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢 2015-04-13 16:15:26
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风轻快乐 at 2015-04-13 14:50:17
那为什么要用芦丁做标准品?最大吸收波长不一样那测定结果不就不准确了吗?...

芦丁只能提供一个相对含量,准确的含量是得不到的,再说哦黄酮本来就不是纯品的到准确的含量也不可能

[ 发自小木虫客户端 ]
希望各位大神多多指教。。。。
7楼2015-04-13 15:30:13
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yhblove1314

新虫 (初入文坛)

请问你的问题解决了么?我也遇到这样的问题,样品出现褐色,峰宽。和芦丁万全不一致啊。
8楼2015-08-06 20:35:19
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风轻快乐

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by yhblove1314 at 2015-08-06 20:35:19
请问你的问题解决了么?我也遇到这样的问题,样品出现褐色,峰宽。和芦丁万全不一致啊。

出现褐色是因为浓度有点大,用槲皮素做标品。
9楼2015-08-07 11:10:31
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