应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » RP-HPLC出峰问题
52/1返回列表
查看: 1749  |  回复: 27
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hqj200808

铜虫 (小有名气)

[求助] RP-HPLC出峰问题已有4人参与

请教各位虫虫，
    跑标品的时候，竟然没有峰出来会是什么原因呀，隐黄素（一种脂溶性、弱极性的色素），C18柱，PDA检测器，用的流动相：乙腈：水=9：1，会不会是流动相的问题？还是其他的问题呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2015-04-10 16:45:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hqj200808

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by cpuclz at 2015-04-12 18:11:27
乙酸乙酯和水不能互溶，会损伤柱子。
反相柱在设计时，是用水、乙腈、甲醇做流动相的，用乙酸乙酯的话会损伤柱子。
尽量避免用乙酸乙酯或者二氯甲烷之类的，用四氢呋喃代替。...

哦，那如果不加水呢？是说上次用的时候跑完标品，跑样品的时候就出现柱压过高
赞一下 回复此楼
18楼2015-04-12 18:31:36
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答

supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hqj200808: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-11 22:58:54
90%乙腈？pda可以看全波长范围内的吸收，你挪动波长看看有没有峰。也可以用紫外看看有没有吸收和最大吸收波长。
赞一下 回复此楼
2楼2015-04-10 17:26:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hqj200808

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by supercat0821 at 2015-04-10 17:26:59
90%乙腈？pda可以看全波长范围内的吸收，你挪动波长看看有没有峰。也可以用紫外看看有没有吸收和最大吸收波长。

用紫外分光光度计200-800nm扫描，有两个吸收峰 其中一个在453nm吸光度1.6几和目标物差不多，还有一个245 而且吸光度9.999，且基线不是很平稳。PS：标品用丙酮溶解，吸取200μl用乙腈定溶至10ml，20μl的上样量。不知分光光度计基线不平是否与溶解用的丙酮有关，开始以为HPLC上样量少就没管了，会影响HPLC么  谢谢
赞一下 回复此楼
3楼2015-04-10 20:47:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

supercat0821

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hqj200808 at 2015-04-10 20:47:49
用紫外分光光度计200-800nm扫描，有两个吸收峰 其中一个在453nm吸光度1.6几和目标物差不多，还有一个245 而且吸光度9.999，且基线不是很平稳。PS：标品用丙酮溶解，吸取200μl用乙腈定溶至10ml，20μl的上样量。不 ...

丙酮是第一步溶解的时候用了，后来用了乙腈稀释的，不会影响很大。波长你用245吧，400多都超了UV范围了。基线不平稳的因素有很多，可能与仪器是否平衡好也有关。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-04-11 22:12:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 28 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭