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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 过反相，一堆峰，都挤到一起了，肿么办？求指点
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hydros

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
10楼: Originally posted by holmessakura at 2015-04-09 15:56:49
1: 梯度的增加主要是20-40-60-80-100这样，每一个梯度一段时间；每一次收集我个人觉得收集能收集的最大量；
2：中亚主要是分段，用在浸膏过完第一次大柱子之后就上中亚，没有特征峰不代表没东西，还是以TLC为准；
...

老板让多用，不一定听他的。要根据实际情况取舍，个人觉得粗分阶段还是不用中压好。到后期可以用中压，一切以工作便利为宗旨，最多做点样子给老板看。硅胶板能展起来的，在柱子上不会死吸附很多。大极性的上反相效果不一定好，不易保留。可以试试MCI，国产的很便宜，效果跟进口相当。回收水的话没有设备只能用旋蒸，偶尔往里面加点甲醇，回收也挺快。

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11楼2015-04-09 16:10:23
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hydros

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
kedaxyn: 金币+4, ★★★很有帮助, 非常感谢 2015-04-09 19:17:12
wangkaibo123: 金币+1, 欢迎积极交流 谢谢 2015-04-11 12:21:36
老板让多用，不一定听他的。要根据实际情况取舍，个人觉得粗分阶段还是不用中压好。到后期可以用中压，一切以工作便利为宗旨，最多做点样子给老板看。硅胶板能展起来的，在柱子上不会死吸附很多。大极性的上反相效果不一定好，不易保留。可以试试MCI，国产的很便宜，效果跟进口相当。回收水的话没有设备只能用旋蒸，偶尔往里面加点甲醇，回收也挺快。 梯度洗脱每次增加10-20%

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12楼2015-04-09 16:12:38
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sky10016

木虫 (著名写手)
★
wangkaibo123: 金币+1, 欢迎积极交流 谢谢 2015-04-11 12:23:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by kedaxyn at 2015-04-08 22:44:24
没有峰？我从水一直过到纯甲醇，大概都是这样的，怎么说？求指点...

你看看中低压色谱的指导手册，里边应该有一些分离的例子，你看看这些例子的峰是怎么样的，你再看看你的谱图。可能是你的检测波长不对。
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方寸间，历数世上桑田沧海；时空里，细问人间暑往寒来；是朋友，星移斗转情不改；是知音，天涯海角记心怀。
13楼2015-04-09 17:22:38
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wstt1991

实习版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
峰那么紧凑，一看就是溶剂

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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14楼2015-04-09 17:26:59
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kedaxyn

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by wstt1991 at 2015-04-09 17:26:59
峰那么紧凑，一看就是溶剂

可是为什么甲醇比例较高时出现这样情况，前面比例较低的时候没有遇到类似的，求指点
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认真过好每一天
15楼2015-04-09 19:14:28
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kedaxyn

金虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by sky10016 at 2015-04-09 17:22:38
你看看中低压色谱的指导手册，里边应该有一些分离的例子，你看看这些例子的峰是怎么样的，你再看看你的谱图。可能是你的检测波长不对。...

嗯，谢谢建议。
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认真过好每一天
16楼2015-04-09 19:14:52
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yyajie

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wangkaibo123: 金币+1, 欢迎积极交流 谢谢 2015-04-11 12:23:57
kedaxyn: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-04-11 13:44:17
如果你能在紫外灯下看到样品点，那么仪器的检测能力应该是没问题的。
确认一下两者的波长就行。
你在平衡柱子的时候有没有溶剂峰呢？
还有我觉得你的洗脱时间可能太短了，每个梯度的用量你用多一点，你试试每10%梯度用30min以上洗脱看看。
如果你的样品是比较集中的一起下来，那么可能也会出现你上面那种图的。
然后，再洗脱过程中不要太相信仪器，其实你就用TLC去多点点板那个跑板还是很清楚的。
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异想天开，胆大心细！
17楼2015-04-11 10:55:11
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kedaxyn

金虫 (正式写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by yyajie at 2015-04-11 10:55:11
如果你能在紫外灯下看到样品点，那么仪器的检测能力应该是没问题的。
确认一下两者的波长就行。
你在平衡柱子的时候有没有溶剂峰呢？
还有我觉得你的洗脱时间可能太短了，每个梯度的用量你用多一点，你试试每10% ...

嗯，谢谢你的建议。可能我冲得不够久，每10%一段就冲了10min，一会就试试多冲些时间，看看效果怎样。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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认真过好每一天
18楼2015-04-11 13:43:44
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yyajie

木虫 (小有名气)
开始做不要怕浪费溶剂。先看看趋势。
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异想天开，胆大心细！
19楼2015-04-11 16:38:01
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tazhongren

金虫 (正式写手)
感觉检测波长不对，没有峰啊

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20楼2015-04-11 18:20:16
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