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litong200933

木虫 (小有名气)

[求助] 关于霉菌的进一步纯化已有1人参与

请教论坛中的大神。
    背景:做了霉菌的稀释涂布分离,3天后不同稀释度下都长有不少霉菌(稀释度低甚至长满整个平板)。
    想进一步分离平板中的霉菌,得到单个菌落的平板。于是又做了平板划线分离。
    问题一:直接用接种环取之前涂布分离的平板上的霉菌,这样行吗?
    问题二:接种环是软的,挑去霉菌很不方便,有什么技巧吗?
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凡事预则立,不预则废。
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orangeleaf

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
litong200933: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-04-08 20:31:41
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2015-04-09 08:34:00
有孢子的?:
问题一:直接用接种环取之前涂布分离的平板上的霉菌,这样行吗?
平板划线分离没有稀释涂布分离好,继续用稀释涂布分离,分离到单孢子菌落。
问题二:接种环是软的,挑去霉菌很不方便,有什么技巧吗?
接种环在霉菌菌落上轻微触碰就可以粘上孢子了。
工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
2楼2015-04-08 11:05:52
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zhangguili

铁杆木虫 (正式写手)

菌落疯长,可以加入氯化钠做高渗,控制菌落直径;
显微镜下,取少量菌丝或少量孢子,然后进行梯度;
3楼2015-04-08 14:46:24
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litong200933

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by orangeleaf at 2015-04-08 04:05:52
有孢子的?:
问题一:直接用接种环取之前涂布分离的平板上的霉菌,这样行吗?
平板划线分离没有稀释涂布分离好,继续用稀释涂布分离,分离到单孢子菌落。
问题二:接种环是软的,挑去霉菌很不方便,有什么技巧吗 ...

您好!
您的回帖很有帮助,有一点疑惑就是,继续做稀释涂布分离。具体的操作是什么呢?是把培养基捣碎,然后稀释梯度,再涂布吗?这里的具体操作有点不明白。
凡事预则立,不预则废。
4楼2015-04-08 20:34:31
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orangeleaf

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by litong200933 at 2015-04-08 20:34:31
您好!
您的回帖很有帮助,有一点疑惑就是,继续做稀释涂布分离。具体的操作是什么呢?是把培养基捣碎,然后稀释梯度,再涂布吗?这里的具体操作有点不明白。...

稀释孢子涂布直到一个板长1~5个菌落,选单菌落挑菌丝(培养时间短点,不要太长;可选改变培养基组分或加抑制霉菌生长的药剂来控制菌落直径),再转新平板或液体培养,即分离成功。
工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
5楼2015-04-09 10:52:18
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