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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 关于霉菌的进一步纯化
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litong200933

木虫 (小有名气)

[求助] 关于霉菌的进一步纯化 已有1人参与

请教论坛中的大神。
    背景：做了霉菌的稀释涂布分离，3天后不同稀释度下都长有不少霉菌（稀释度低甚至长满整个平板)。
    想进一步分离平板中的霉菌，得到单个菌落的平板。于是又做了平板划线分离。
    问题一：直接用接种环取之前涂布分离的平板上的霉菌，这样行吗？
    问题二：接种环是软的，挑去霉菌很不方便，有什么技巧吗？
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凡事预则立，不预则废。
1楼 2015-04-07 21:19:30
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orangeleaf

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
litong200933: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-04-08 20:31:41
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2015-04-09 08:34:00
有孢子的？：
问题一：直接用接种环取之前涂布分离的平板上的霉菌，这样行吗？
平板划线分离没有稀释涂布分离好，继续用稀释涂布分离，分离到单孢子菌落。
问题二：接种环是软的，挑去霉菌很不方便，有什么技巧吗？
接种环在霉菌菌落上轻微触碰就可以粘上孢子了。
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工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
2楼2015-04-08 11:05:52
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zhangguili

铁杆木虫 (正式写手)
菌落疯长，可以加入氯化钠做高渗，控制菌落直径；
显微镜下，取少量菌丝或少量孢子，然后进行梯度；
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3楼2015-04-08 14:46:24
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litong200933

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by orangeleaf at 2015-04-08 04:05:52
有孢子的？：
问题一：直接用接种环取之前涂布分离的平板上的霉菌，这样行吗？
平板划线分离没有稀释涂布分离好，继续用稀释涂布分离，分离到单孢子菌落。
问题二：接种环是软的，挑去霉菌很不方便，有什么技巧吗 ...

您好！
您的回帖很有帮助，有一点疑惑就是，继续做稀释涂布分离。具体的操作是什么呢？是把培养基捣碎，然后稀释梯度，再涂布吗？这里的具体操作有点不明白。
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凡事预则立，不预则废。
4楼2015-04-08 20:34:31
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orangeleaf

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by litong200933 at 2015-04-08 20:34:31
您好！
您的回帖很有帮助，有一点疑惑就是，继续做稀释涂布分离。具体的操作是什么呢？是把培养基捣碎，然后稀释梯度，再涂布吗？这里的具体操作有点不明白。...

稀释孢子涂布直到一个板长1～5个菌落，选单菌落挑菌丝（培养时间短点，不要太长；可选改变培养基组分或加抑制霉菌生长的药剂来控制菌落直径），再转新平板或液体培养，即分离成功。
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工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
5楼2015-04-09 10:52:18
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