应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白质纯化
51/1返回列表
查看: 1439  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tongqingjia

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质纯化 已有3人参与

研究的是带有GST标签的融合蛋白，柱上切收集的蛋白浓缩后（1ml左右），跑胶出现多条杂蛋白带，是不是蛋白液浓缩体积很少时，很多非目的蛋白的条带都会出现？急需指导，麻烦虫子们给予帮助吧，谢谢谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-04-01 09:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongqingjia

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wanglele87 at 2015-04-01 11:04:54
GST特异性比较好，一般过完是会比较纯的，可能会有一些单独的tag。不过我一般不会柱上切，回elute下来再切。分子筛一般纯化效果不好，除非蛋白分子量差别比较大，用来换buffer，一般作为最后一步纯化。楼主先换掉g ...

非常感谢你的回答，希望以后还可以请教你。
赞一下 回复此楼
5楼2015-04-01 19:55:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

wanglele87

金虫 (著名写手)
这个问题我竟不知如何回答。不纯只能说过得亲和竹效果不好，再试试离子柱分子筛的看看吧

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

tongqingjia
一生不羁放纵爱自由
2楼2015-04-01 09:41:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tongqingjia

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanglele87 at 2015-04-01 09:41:31
这个问题我竟不知如何回答。不纯只能说过得亲和竹效果不好，再试试离子柱分子筛的看看吧

柱材料是4FF,而且过夜结合，柱上切之后，将收集的蛋白重新反挂柱除去GST，是不是利用亲和柱纯化效果不如分子筛 之类的？
赞一下 回复此楼
3楼2015-04-01 10:21:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglele87

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-04-02 23:35:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by tongqingjia at 2015-04-01 10:21:36
柱材料是4FF,而且过夜结合，柱上切之后，将收集的蛋白重新反挂柱除去GST，是不是利用亲和柱纯化效果不如分子筛 之类的？...

GST特异性比较好，一般过完是会比较纯的，可能会有一些单独的tag。不过我一般不会柱上切，回elute下来再切。分子筛一般纯化效果不好，除非蛋白分子量差别比较大，用来换buffer，一般作为最后一步纯化。楼主先换掉gsh，反挂下gst柱试试，不行的话试试离子柱。有的时候可能是蛋白折叠的问题，常常会粘一些杂蛋白，不好分开。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
一生不羁放纵爱自由
4楼2015-04-01 11:04:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭