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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 做wb，一抗选择，求大神指导
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wxk19960113

金虫 (小有名气)

[求助] 做wb，一抗选择，求大神指导 已有5人参与

新手做wb，检测某低等生物特定蛋白的表达情况，该如何选择一抗，（一般抗体都是鼠源，兔源。比如检测小鼠体内某蛋白，一抗可用兔抗鼠，）如果我检测的生物也用兔抗鼠，那么该生物和鼠的同源性至少应该多高？除同源性外，还需注意什么？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2015-03-28 00:13:15
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叶晓波1572

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wxk19960113: 金币+1, ★有帮助 2015-03-30 21:04:17
赞同一楼的观点  像楼主这种情况  确实可以自己制备抗体 兔多抗2-3个月就可以了  自己没有条件的话  抗体制备的技术服务也很多 一般3000左右吧
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4楼2015-03-30 11:29:01
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SAM001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wxk19960113: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-03-30 21:13:31
一抗一般是鼠、兔、羊等生物来源，如果你要用兔抗鼠，那么你的蛋白最好是与鼠蛋白同源性较高、与兔同源性低的，可以通过文献看看其他人怎么做，用什么抗体，这是最好了。除了同源性还要注意抗体浓度，质量啥的。
你完全可以拿到蛋白自己去打老鼠或者兔子，获得满意的抗体
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wxk19960113
2楼2015-03-29 12:42:58
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wxk19960113: 金币+2, ★有帮助 2015-03-30 00:56:15
Western_Blot详解(原理、分类、试剂、步骤及问题解答)
http://www.doc88.com/p-314883502286.html
求助:关于western blot一抗二抗的选择
http://www.360doc.com/content/10/0707/16/850939_37455264.shtml
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3楼2015-03-29 13:18:25
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wxk19960113

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by SAM001 at 2015-03-29 12:42:58
一抗一般是鼠、兔、羊等生物来源，如果你要用兔抗鼠，那么你的蛋白最好是与鼠蛋白同源性较高、与兔同源性低的，可以通过文献看看其他人怎么做，用什么抗体，这是最好了。除了同源性还要注意抗体浓度，质量啥的。
你 ...

在ncbi做blast，比对结果与鼠同源性大概80％，可以用吗

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2015-03-30 20:59:35
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