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急！连接失败，是什么原因？
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| 各位虫友：我的目的基因经TA克隆双酶切回收，载体为pET-22b（+），也经双酶切后回收酶切片断，我的酶切为点为NdeI和HindIII，经过多次实验，结果连接转化总是失败，筛不到阳性转化子，请问大家这最有可能是什么原因？ |
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