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遇见1314

铜虫 (初入文坛)

[求助] 跪求植物切片方法 已有2人参与

一种具有荧光性质的化合物存在于叶片中,想通过荧光显微镜观察它在叶片中的具体位置,预测其主要存在于叶绿体中,该怎么制作切片呢?以前没有接触过完全零基础,可不可以直接做简单的撕片呢,还是需要再做些其他处理?
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guoguo1028

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不知道你的问题解决了没有,首先说一下,撕表皮是不合适的,因为你要的荧光是存在于叶绿体的,但撕下的表皮里根本就不会有叶绿体存在,所以这种方法是行不通的。
     恰好我以前做过类似的试验,如果观察荧光的话,你的样品前期是不是不用固定啊?如果这样的话,建议做冰冻切片。
     样品(叶片)直接用荧光标记后,直接在冰冻切片机下冷冻包埋,然后切片,在荧光显微镜下观察。
     如果叶片纤维化程度较高,冰冻切片的厚度可以达到5微米,置于普通荧光显微镜下可以很清楚的看到叶绿体。
11楼2015-05-20 10:35:51
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银绳

木虫 (著名写手)

植物菜鸟

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最简单直接的方法就是表皮撕片。建议先做表皮撕片确定具体位置,因为其他方法比如粉末,横切,纵切片等看的范围很局部。
爱好植物,但是是一只菜鸟!
2楼2015-03-11 09:15:17
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遇见1314

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 银绳 at 2015-03-11 09:15:17
最简单直接的方法就是表皮撕片。建议先做表皮撕片确定具体位置,因为其他方法比如粉末,横切,纵切片等看的范围很局部。

表皮撕片只能供即时观察吧,如果要保存若几天该怎么处理呢?
3楼2015-03-11 20:06:16
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银绳

木虫 (著名写手)

植物菜鸟

引用回帖:
3楼: Originally posted by 遇见1314 at 2015-03-11 20:06:16
表皮撕片只能供即时观察吧,如果要保存若几天该怎么处理呢?...

你要是有鲜材,最好还是做表皮撕片啊。你的意思是做好之后不好保存吗?是不是可以尝试用中性树胶固定,做永久制片呢,可以尝试一下。
爱好植物,但是是一只菜鸟!
4楼2015-03-11 20:26:20
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