应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 才刚刚学养细胞，老板又要我细胞荧光染色，不知道操作有无误，心里没底，前来求助。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
52/1返回列表
查看: 1909  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tingy1986

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 才刚刚学养细胞，老板又要我细胞荧光染色，不知道操作有无误，心里没底，前来求助。 已有3人参与

有前辈用过BCECF-AM荧光染色染料吗？才刚刚学养细胞，又要我荧光染色，心里没底，前来求助。
试剂终于配好了，在life买的BCECF-AM。和配套用的pHi缓冲液kit。 试剂已经配好了，上周也实践了一次。由于我们实验室其他人也没有做过这个实验。所以也不能给我多好的建议。所以前来求教。哪怕是一点经验也好。
我就想问问我的操作方面，有没有不对的地方。
如果有不对的地方，希望指导指导我。十分感谢。
我是这样做的
1，细胞培养皿的培养液吸掉
2，pbs洗一遍
3，pbs吸掉
4，trypsin 1ml 37度培养箱3分钟
5，加入培养基（fbs 10%）吹打成细胞悬液
6，离心 1000rpm 3分钟
7，吸掉培养基
8，加入pbs 吹打成细胞悬液
9，离心 1000rpm 3分钟
10，吸掉pbs。
11，加入pbs 10ml 吹打成细胞悬液
12，分装到1.5ml的 tube里。
13，离心3000rpm 3分钟
14，吸掉pbs。
15，从1.5ml的tube里，转移一部分细胞到96孔well。
16，37度培养箱20分钟
17，放入酶标仪分析。
由于我从来没有接触过培养细胞技术这些，网上也看了一些材料，感觉不太相信自己，所以请达人前辈们帮忙指点迷津，由于想测活细胞内的ph值。尽可能希望细胞状态好点的坚持到酶标仪这一步。 不知道该如何操作更好一点。
谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-03-09 09:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿道夫巴雅尔

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
为啥要一直离心细胞？你这个过程确定就不会影响细胞么？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
11楼2017-07-15 08:40:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

tingy1986

专家顾问
2楼2015-03-09 10:19:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tingy1986

主管区长
3楼2015-03-09 11:31:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
从始至终只见你不断离心细胞，就没见你用染料，这是搞什么？
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2015-03-11 17:51:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂一志愿合肥工业大学 +14 秋二十二 2026-03-30 14/700 2026-04-01 11:45 by chemdavid
[考研] 材料调剂 +10 Eujd1 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:23 by ivanqyq
[考研] 284求调剂 +11 小熊～～ 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:13 by 逆水乘风
[考研] 生物与医药考研调剂 +3 铁憨憨123425 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:53 by judy105
[考研] 环境工程调剂 +7 hyzzzzzzz. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 10:42 by 给你你注意休息
[考研] 273求调剂 +14 李芷新1 2026-03-31 14/700 2026-04-01 09:32 by fangnagu
[考研] 350求调剂 +6 阿佳～ 2026-03-31 6/300 2026-04-01 08:49 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +3 wwwwffffff 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:49 by 曾曾曾！
[考研] 求调剂 +9 akdhjs 2026-03-31 10/500 2026-03-31 17:14 by zhyzzh
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-30 11/550 2026-03-31 16:34 by 邱gl
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 13/650 2026-03-31 14:58 by 王亮_大连医科大
[考研] 本科211生物医学工程085409求调剂339分 +7 里子木yy 2026-03-29 7/350 2026-03-31 14:35 by fmesaito
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 343求调剂085601 +3 要努力学习x 2026-03-29 3/150 2026-03-29 18:35 by wxiongid
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭