| 查看: 1888 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
tingy1986金虫 (正式写手)
|
[求助]
才刚刚学养细胞，老板又要我细胞荧光染色，不知道操作有无误，心里没底，前来求助。 已有3人参与
|
||
|
有前辈用过BCECF-AM荧光染色染料吗？才刚刚学养细胞，又要我荧光染色，心里没底，前来求助。 试剂终于配好了，在life买的BCECF-AM。和配套用的pHi缓冲液kit。 试剂已经配好了，上周也实践了一次。由于我们实验室其他人也没有做过这个实验。所以也不能给我多好的建议。所以前来求教。哪怕是一点经验也好。 我就想问问我的操作方面，有没有不对的地方。 如果有不对的地方，希望指导指导我。十分感谢。 我是这样做的 1，细胞培养皿的培养液吸掉 2，pbs洗一遍 3，pbs吸掉 4，trypsin 1ml 37度培养箱3分钟 5，加入培养基（fbs 10%）吹打成细胞悬液 6，离心 1000rpm 3分钟 7，吸掉培养基 8，加入pbs 吹打成细胞悬液 9，离心 1000rpm 3分钟 10，吸掉pbs。 11，加入pbs 10ml 吹打成细胞悬液 12，分装到1.5ml的 tube里。 13，离心3000rpm 3分钟 14，吸掉pbs。 15，从1.5ml的tube里，转移一部分细胞到96孔well。 16，37度培养箱20分钟 17，放入酶标仪分析。 由于我从来没有接触过培养细胞技术这些，网上也看了一些材料，感觉不太相信自己，所以请达人前辈们帮忙指点迷津，由于想测活细胞内的ph值。尽可能希望细胞状态好点的坚持到酶标仪这一步。 不知道该如何操作更好一点。 谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有147人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 心里没底，求调剂推荐……
已经有13人回复
 |
3楼2015-03-09 11:31:42
 |
2楼2015-03-09 10:19:43
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17156.7
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14521
- 在线: 2184.1小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
4楼2015-03-11 17:51:54
tingy1986
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 957.7
- 散金: 640
- 帖子: 630
- 在线: 59.6小时
- 虫号: 3228887
- 注册: 2014-05-23
- 性别: GG
- 专业: 脑血管结构、功能异常及相
5楼2015-03-11 19:07:46
