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cherishjy

木虫 (小有名气)


xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-21 09:47:49
引用回帖:
16楼: Originally posted by xn8008 at 2016-10-20 23:14:41
那估计是上个可能原因,第一你用的东西可能被污染了,含有RNA酶,第二你的样品本身RNA少了,自身发生降解,保存不善,反复冻融,第三是你的试剂有问题,不是有过期的就是有可能有的被污染了,或者本身试剂天然就不 ...

第一个问题:我用了一套新的枪头;第二个问题:trizol提出来的浓度达到了4300ng/ul;第三个问题:我也怀疑过试剂盒有问题,所以同时做了一批新试剂盒、旧试剂盒、还有trizol提取的组,发现新旧试剂盒提取浓度没有差别,都不高,trizol很高,三个组也同时跑胶了,试剂盒组浓度太低看不出条带,trizol组浓度很高但是一条拖尾带。试剂盒是Qiagen的组织提取试剂盒。

发自小木虫Android客户端
21楼2016-10-21 08:37:47
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel

引用回帖:
21楼: Originally posted by cherishjy at 2016-10-21 08:37:47
第一个问题:我用了一套新的枪头;第二个问题:trizol提出来的浓度达到了4300ng/ul;第三个问题:我也怀疑过试剂盒有问题,所以同时做了一批新试剂盒、旧试剂盒、还有trizol提取的组,发现新旧试剂盒提取浓度没有差 ...

你说的全是Trizol,而我关注的是你提取蛋白用的异丙醇,氯仿和乙醇的比例什么的,一般拖尾都是因为蛋白去除不干净,你新买些试剂,用最原始的方法提取试试看吧
奋斗是我们前进的动力!
22楼2016-10-21 09:46:23
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23楼2016-10-21 11:07:04
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cherishjy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by xn8008 at 2016-10-21 09:46:23
你说的全是Trizol,而我关注的是你提取蛋白用的异丙醇,氯仿和乙醇的比例什么的,一般拖尾都是因为蛋白去除不干净,你新买些试剂,用最原始的方法提取试试看吧...

不是全部trizol组,有试剂盒组呀,我用了qiagen的试剂盒。

发自小木虫Android客户端
24楼2016-10-21 21:37:11
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel

【答案】应助回帖

引用回帖:
24楼: Originally posted by cherishjy at 2016-10-21 21:37:11
不是全部trizol组,有试剂盒组呀,我用了qiagen的试剂盒。
...

哦,我对天根的试剂盒有心理阴影。

发自小木虫IOS客户端
奋斗是我们前进的动力!
25楼2016-10-21 22:58:11
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cherishjy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
25楼: Originally posted by xn8008 at 2016-10-21 22:58:11
哦,我对天根的试剂盒有心理阴影。
...

天根是Tiangen,我用的是凯杰Qiagen。
26楼2016-10-21 23:21:28
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel

奋斗是我们前进的动力!
27楼2016-10-21 23:31:13
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