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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA提取问题
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cherishjy

木虫 (小有名气)
★
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-10-21 09:47:49
引用回帖:
16楼: Originally posted by xn8008 at 2016-10-20 23:14:41
那估计是上个可能原因，第一你用的东西可能被污染了，含有RNA酶，第二你的样品本身RNA少了，自身发生降解，保存不善，反复冻融，第三是你的试剂有问题，不是有过期的就是有可能有的被污染了，或者本身试剂天然就不 ...

第一个问题：我用了一套新的枪头；第二个问题：trizol提出来的浓度达到了4300ng/ul;第三个问题：我也怀疑过试剂盒有问题，所以同时做了一批新试剂盒、旧试剂盒、还有trizol提取的组，发现新旧试剂盒提取浓度没有差别，都不高，trizol很高，三个组也同时跑胶了，试剂盒组浓度太低看不出条带，trizol组浓度很高但是一条拖尾带。试剂盒是Qiagen的组织提取试剂盒。

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21楼2016-10-21 08:37:47
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
引用回帖:
21楼: Originally posted by cherishjy at 2016-10-21 08:37:47
第一个问题：我用了一套新的枪头；第二个问题：trizol提出来的浓度达到了4300ng/ul;第三个问题：我也怀疑过试剂盒有问题，所以同时做了一批新试剂盒、旧试剂盒、还有trizol提取的组，发现新旧试剂盒提取浓度没有差 ...

你说的全是Trizol，而我关注的是你提取蛋白用的异丙醇，氯仿和乙醇的比例什么的，一般拖尾都是因为蛋白去除不干净，你新买些试剂，用最原始的方法提取试试看吧
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奋斗是我们前进的动力！
22楼2016-10-21 09:46:23
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浩月照沧海
66

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23楼2016-10-21 11:07:04
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cherishjy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
22楼: Originally posted by xn8008 at 2016-10-21 09:46:23
你说的全是Trizol，而我关注的是你提取蛋白用的异丙醇，氯仿和乙醇的比例什么的，一般拖尾都是因为蛋白去除不干净，你新买些试剂，用最原始的方法提取试试看吧...

不是全部trizol组，有试剂盒组呀，我用了qiagen的试剂盒。

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24楼2016-10-21 21:37:11
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel

【答案】应助回帖

引用回帖:
24楼: Originally posted by cherishjy at 2016-10-21 21:37:11
不是全部trizol组，有试剂盒组呀，我用了qiagen的试剂盒。
...

哦，我对天根的试剂盒有心理阴影。

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25楼2016-10-21 22:58:11
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cherishjy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by xn8008 at 2016-10-21 22:58:11
哦，我对天根的试剂盒有心理阴影。
...

天根是Tiangen，我用的是凯杰Qiagen。
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26楼2016-10-21 23:21:28
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
哦，没用过

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奋斗是我们前进的动力！
27楼2016-10-21 23:31:13
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