| 查看: 5515 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
酵母双杂交AD载体构建 已有4人参与
|
||
通过酵母双杂交筛选到互作蛋白，目前正在构建AD载体，其中photosystem I assembly protein Ycf4和TRAF transcription factor这两个基因，克隆测序后，酶切后与pGADT7连接，跑胶检测存在目的条带（连接应该没有问题），连接产物10ul转化全式金公司大肠杆菌感受态，冰浴40min；42°，60S；冰浴2.5min，SOC恢复培养1h，100ul涂氨苄抗性平板，过夜培养约14h，有克隆长出，而且存在大量类似于未涂均匀的菌落，菌液PCR检测无阳性克隆。重复几次怀疑是感受态有问题，又做了转化puc19和pGADT7的阳性对照，菌落生长情况与前面情况相同，请见图。目前怀疑抗生素有问题，烦请各位高手帮忙分析下可能存在的原因，感激， 。 control.jpg  pGADT7.jpg  YCF4.jpg  TRAF.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有157人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
11楼2015-11-17 14:51:11
2楼2015-02-28 11:37:07
3楼2015-02-28 12:19:09
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2015-02-28 13:08:43