应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求biotin连接catalase的详细实验报告，实在不行avidin连catalase的也行
51/1返回列表
查看: 575  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yw的小号

铁虫 (小有名气)

[求助] 求biotin连接catalase的详细实验报告，实在不行avidin连catalase的也行 已有1人参与

求biotin连接catalase的详细实验报告，实在没有biotin的话，avidin连catalase的也行
最好是亲测可用的！

手头上有biotin-NHS 溶解在DMF里，catalase粉末，avidin溶解在PBS里，另有其他基本试剂（试剂质量和纯度绝对靠谱）。
试过好几篇文章的方法。连是连上了，但是产率很低，哪位大神正好做过这个，求指点，和详细实验步骤。

十分感谢！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-02-25 18:37:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yw的小号

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chongju135 at 2015-02-25 20:35:53
记得thermo试剂中有其他的biotin试剂，EDC／NHS的效果比较差，可以试试巯基偶联。

谢谢您的回答！
先试试EDC／NHS的，如果试剂都用完了还达不到效果就换您说的。
另：一般biotin和蛋白的摩尔比是多少啊，书里写的2-20不等，文献里有超过200的

继续等大神回复！！
赞一下 回复此楼
3楼2015-02-26 23:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

chongju135

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
记得thermo试剂中有其他的biotin试剂，EDC／NHS的效果比较差，可以试试巯基偶联。
赞一下 回复此楼
2楼2015-02-25 20:35:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chongju135

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yw的小号 at 2015-02-26 23:26:19
谢谢您的回答！
先试试EDC／NHS的，如果试剂都用完了还达不到效果就换您说的。
另：一般biotin和蛋白的摩尔比是多少啊，书里写的2-20不等，文献里有超过200的

继续等大神回复！！...

这需要看你打算绑定多少个biotin而定，如果你用的是EDC／NHS的话，要看蛋白表面的K是否多了，我以前用过1:20的，能连上5个左右，质谱能显示1～7个，最多的在4，5吧。2～20，我觉得最少都要5倍的量。如果你用巯基的话用3倍量就行了！
赞一下 回复此楼
4楼2015-02-26 23:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yw的小号

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chongju135 at 2015-02-26 23:35:20
这需要看你打算绑定多少个biotin而定，如果你用的是EDC／NHS的话，要看蛋白表面的K是否多了，我以前用过1:20的，能连上5个左右，质谱能显示1～7个，最多的在4，5吧。2～20，我觉得最少都要5倍的量。如果你用巯基的 ...

谢谢您的再次回答，我想绑定的biotin越多越好，另外还有两个问题想请教

1。用EDC|NHS的话，如果是avidin连catalase， 能连上几个catalase呢？（需要连接上尽量多的catalase）
2。巯基连接的话，您有推荐的文章吗？

再次感谢
赞一下 回复此楼
5楼2015-03-02 17:15:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？ +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！ 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭