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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » ELISA测定一类物质的含量？
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tmty

金虫 (著名写手)

[求助] ELISA测定一类物质的含量？ 已有1人参与

已经测定所得的抗体对几种物质具有较高的交叉反应率，怎样用ELISA法去测定这几种物质的总含量？
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静夜思雨
1楼 2015-02-25 16:35:08
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tmty

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 寂静之林 at 2015-02-28 11:44:19
假设一下，你的抗体特异性测定物质A，但是该抗体存在对物质B、C、D的交叉反应，假设抗体对物质B、C、D的交叉反应分别是B（50%），C（30%），D（20%）。
现在楼主是想用这对抗体在ELISA中去测定某物质X中，物质A、B ...

感谢你的热情解答，我有个疑问，你说假设物质A为100mg时，其OD值为1，那么物质X（OD值=1）含有物质A、B、C、D的量可能会有：100mg的A（总量：100mg），这个可以理解。
但是对于 50mg的A+100mg的B（总量：150mg），50mgA+50mg的B+83mg的C（总量：183mg），25mg的A+60mgB+40mg的C+165mg的D（总量：290），这几种可能性，为什么其OD值为1？
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静夜思雨
5楼2015-02-28 15:42:26
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GKV1301

铁虫 (初入文坛)
好像不行吧？
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2楼2015-02-28 10:13:37
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tmty

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by GKV1301 at 2015-02-28 10:13:37
好像不行吧？

我看到有些文献上报道是可以的，以CR为100%的物质作标准曲线进行检测。
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静夜思雨
3楼2015-02-28 11:39:58
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寂静之林

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tmty: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢！ 2015-02-28 15:21:46
tmty: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2015-03-04 12:52:23
假设一下，你的抗体特异性测定物质A，但是该抗体存在对物质B、C、D的交叉反应，假设抗体对物质B、C、D的交叉反应分别是B（50%），C（30%），D（20%）。
现在楼主是想用这对抗体在ELISA中去测定某物质X中，物质A、B、C、D的总含量？
如果已知物质X只含有物质A、B、C、D中的一种，那你可以测定那种物质的总量的。
如果物质X含有物质A、B、C、D中两种或两种以上，那就不能测定物质X中所含有的物质A、B、C、D的总量。因为通过ELISA实验，你可以得到物质X的OD值，但是你不能确定是物质A、B、C、D的哪种或哪几种导致了该OD值的产生。举个例子，假设因为通过ELISA实验，你得到物质X的OD值为1，再假设物质A为100mg时，其OD值为1，那么物质X（OD值=1）含有物质A、B、C、D的量可能会有：100mg的A（总量：100mg），50mg的A+100mg的B（总量：150mg），50mgA+50mg的B+83mg的C（总量：183mg），25mg的A+60mgB+40mg的C+165mg的D（总量：290）等等，有无数种可能性，而且每一种可能性的总量都不同，所以根本就无法确定物质X中所含有的物质A、B、C、D的总量。
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4楼2015-02-28 11:44:19
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