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tmty金虫 (著名写手)
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ELISA测定一类物质的含量？ 已有1人参与
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| 已经测定所得的抗体对几种物质具有较高的交叉反应率，怎样用ELISA法去测定这几种物质的总含量？ |
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2楼2015-02-28 10:13:37
tmty
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3楼2015-02-28 11:39:58
【答案】应助回帖
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假设一下，你的抗体特异性测定物质A，但是该抗体存在对物质B、C、D的交叉反应，假设抗体对物质B、C、D的交叉反应分别是B（50%），C（30%），D（20%）。 现在楼主是想用这对抗体在ELISA中去测定某物质X中，物质A、B、C、D的总含量？ 如果已知物质X只含有物质A、B、C、D中的一种，那你可以测定那种物质的总量的。 如果物质X含有物质A、B、C、D中两种或两种以上，那就不能测定物质X中所含有的物质A、B、C、D的总量。因为通过ELISA实验，你可以得到物质X的OD值，但是你不能确定是物质A、B、C、D的哪种或哪几种导致了该OD值的产生。举个例子，假设因为通过ELISA实验，你得到物质X的OD值为1，再假设物质A为100mg时，其OD值为1，那么物质X（OD值=1）含有物质A、B、C、D的量可能会有：100mg的A（总量：100mg），50mg的A+100mg的B（总量：150mg），50mgA+50mg的B+83mg的C（总量：183mg），25mg的A+60mgB+40mg的C+165mg的D（总量：290）等等，有无数种可能性，而且每一种可能性的总量都不同，所以根本就无法确定物质X中所含有的物质A、B、C、D的总量。 |
4楼2015-02-28 11:44:19
tmty
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5楼2015-02-28 15:42:26
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你看看，我前面假设了抗体对物质B、C、D的交叉反应分别是B（50%），C（30%），D（20%）。而抗体对物质A的检测能力则为100%。 50mg的A+100mg的B（总量：150mg）=A贡献了50mg的OD值，B贡献了100mg*50%=50mg的OD值，加起来就是100mg的物质A的OD值。 同理，50mg的A+50mg的B+83mg的C（总量：183mg）就是50mg+50*50%+83*30%=100mg，对应的就是物质A100mg的OD值； 25mg的A+60mgB+40mg的C+165mg的D=25*100%+60+50%+40*30%+165*20%=100mg，对应的就是物质A100mg的OD值。 |
6楼2015-03-04 12:19:45