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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 外周血DNA提取及细胞冻存的问题
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柚子要努力

新虫 (初入文坛)

[求助] 外周血DNA提取及细胞冻存的问题 已有2人参与

各位大神，楼主准备从全血中提取DNA做PCR，但是目前还处于留样阶段，先将各种样品保存下来，可能半年或者一年之后才用，请问应该如何保存？
全血中的DNA肯定来自白细胞，那是应该先把白细胞分离出来冻存，还是全血直接冻存？
冻存的时候需要加什么冷冻保护剂么？
有木有人做过啊，快来指点我！谢谢！！！
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1楼 2015-02-19 21:37:53
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柚子要努力

新虫 (初入文坛)
没有人么？？、
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2楼2015-02-22 20:54:56
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ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+32, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2015-03-03 09:57:42
全血直接冻存，不用加保护液！

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-02-22 21:43:07
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ligy6

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2015-03-03 09:57:50
柚子要努力: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-03-04 20:49:19
全血直接冻存，如果半年或者一年之后才用，最好用-80℃超低温冰箱冻存，至少用-40℃低温冰箱冻存。或者可以随时用新鲜血液提取DNA，然后冻存DNA，这样好一些。
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4楼2015-02-23 23:09:31
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柚子要努力

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ptttmt at 2015-02-22 21:43:07
全血直接冻存，不用加保护液！

不加保护液的话细胞不会被破坏么？会不会提dna的时候效率降低啊？
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5楼2015-03-02 23:08:48
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柚子要努力

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ligy6 at 2015-02-23 23:09:31
全血直接冻存，如果半年或者一年之后才用，最好用-80℃超低温冰箱冻存，至少用-40℃低温冰箱冻存。或者可以随时用新鲜血液提取DNA，然后冻存DNA，这样好一些。

是直接放入-80还是需要先放入-20预冻之类的啊？
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6楼2015-03-02 23:10:07
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ligy6

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 柚子要努力 at 2015-03-02 23:10:07
是直接放入-80还是需要先放入-20预冻之类的啊？...

需要先放入-20℃冷冻，之后再放入-80℃超低温冰箱，主要是直接放入-80℃超低温冰箱后，由于一般试管都不耐低温，会炸裂。如果选用质量比较好的试管，也可以直接-80℃超低温冰箱冻存，可以自己试一试。提取 DNA以新鲜血液为佳，冷冻后细胞会破坏，但DNA存在于细胞核中，不会受到影响。
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7楼2015-03-03 00:31:16
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