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fds1984

银虫 (著名写手)

[求助] 有关适配体的问题

Prior to immobilization of the aptamers, the biotinylated aptamer solution (14 μM aptamers, dissolved in 50 mM Tris-HCl + 20 mM KCl + 600 mM NaCl, pH 7.4) was heated at 90 °C for 3 min followed by cooling at room temperature. The heat treatment was a common practice applied to allow the aptamers to form the desired conformation through renaturation.
请问:以上文献将适配体90 °C加热3分钟后,不会失活了吗?还能继续用来对特定蛋白质的萃取吗?
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robinhud

新虫 (初入文坛)

不会失活,可以用来继续试验,还可以90 °C加热5-10分钟后,立即放到碎冰里·5-10分钟,这样做,可以:allow the aptamers to form the desired conformation ,只有形成了一定的二级结构(一般是颈环结构)即desired conformation ,aptamers才能识别它的靶分子。
2楼2015-02-22 10:36:32
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