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guoxingjun2008金虫 (正式写手)
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[交流]
求高手解释一下基因敲出技术
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| 各位金虫,银虫等等所有的高手们,本人刚刚涉及试验,老板要用潮霉素的一个基因标记取代另一个基因的ORF的主要部分,这属不属于基因敲除技术?我应该怎么去实现这一步,不胜感激!! |
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guohuayin
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2楼2008-06-12 07:20:47
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booksworm
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4楼2008-06-12 10:40:02
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6楼2008-06-12 18:09:08
lybio
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我也想问下基因敲除中,敲除后要用标记基因进行筛选,那么此标志基因是需要表达的吧?常见的选择性标记基因主要有3类:第1类为药物抗性标记基因,第2类为营养缺陷型标记基因,第3类为功能标记基因。实验有关基因敲除方面,就是在目的基因中插入选择标记基因,致使目的基因失活,通过选择标志筛选转化子。想问的问题是: A、对于第1类在载体上的抗性基因,比如在它的上游插入某个基因片段,下游也插入某个基因片段,要使它能在真菌中表达,是不是要保证上游插入的碱基数不影响它的阅读框架? B、对于第2类营养缺陷型标记基因,一方面,与A同样的问题;另一方面,它是不是可以不管上游碱基多少个,只要有标记基因,它就能与缺陷型菌同源重组,就能正常表达,使受体细胞表现野生型生长? |
7楼2008-06-13 09:08:10
lybio
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8楼2008-06-13 09:09:15













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