【答案】应助回帖

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1楼2015-02-01 22:35:57

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张小小美丽

铁虫 (初入文坛)

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宝呗茗(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-02-05 22:01:44

看了楼主的图，有2点可以确定：
1.第7条泳道的那条特殊的条带才是DNA。
2.最下面的那一排是没有去除掉的已经降解的RNA。需要用RNA酶消化才能去除RNA。
至于点样孔里面的亮亮的东西，如果不是你跑胶人为造成的，应该就是残留的蛋白质，你才抽提一次，我们一般都抽提3次，才能基本保证去除蛋白质等大分子的杂质。另外建议你重新跑一下胶，如果还是这样的话，就说明应该是我说的这种情况。
祝你好运。

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fighting!!!

12楼2015-02-03 10:44:25

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wyzl2007

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点样孔下你所谓的杂带就是你想要的DNA

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2楼2015-02-01 22:37:32

宝呗茗

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2楼: Originally posted by wyzl2007 at 2015-02-01 22:37:32
点样孔下你所谓的杂带就是你想要的DNA

那请问第七个孔的那条带是什么啊？

3楼2015-02-01 22:39:03

still2008

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上样量多少，电压多少，跑了多久？看图片好像楼上说的有点道理

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有时一本正经，有时胡言乱语。

4楼2015-02-01 22:46:04

LeeDB

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是不是跑的时间不够，感觉maker没跑开啊

5楼2015-02-01 23:13:17

宝呗茗

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引用回帖:

4楼: Originally posted by still2008 at 2015-02-01 22:46:04
上样量多少，电压多少，跑了多久？看图片好像楼上说的有点道理

上样4ul，电压100V，跑30min

6楼2015-02-01 23:22:54

宝呗茗

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5楼: Originally posted by LeeDB at 2015-02-01 23:13:17
是不是跑的时间不够，感觉maker没跑开啊

跑了半个小时

7楼2015-02-01 23:24:04

李强1

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孔上是蛋白质没有清除干净，你抽提至少2次，尽量不要吸到中间蛋白层。另外你也没有maker呀

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独自等待

8楼2015-02-01 23:36:37

浅语8905

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感觉就是没跑开呀，跑的时间短了，还有怎么没看到maker呢

9楼2015-02-02 12:38:30

18761615793

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宝呗茗(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-05 22:01:59

看marker就知道结果怎样了，marker条带不清楚且量很少。时间，电压都是没问题的。
最下面的一条亮带我认为不是你的目的条带，你的目的片段大小是多少？虽然marker很模糊，但是还是能判断大小的，可以知道亮带是否是非特异性产物。还有胶浓度，好像marker没有完全跑开，胶浓度和分子量是有关系的，分子量越大，胶浓度就越小。
如果真是没有目的片段跑出来的话，就要考虑一下几个方面：模板的提取（纯度），引物的合理性，PCR热启动酶的性能，以及扩增的时间温度循环数

todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful

10楼2015-02-02 13:20:58