【答案】应助回帖

11楼2015-02-01 09:04:01

zzlei

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晚上拍的照片，实验楼门卫催着让走，就急拍了张，还没洗脱得很明显，前面那一块也有条带的，没拍好

12楼2015-02-01 09:06:08

pengyun2521

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
zzlei: 金币+2, ★有帮助 2015-02-01 16:29:57

目的蛋白沉淀与离子浓度和pH都有一定的关系，你可以看看目的蛋白的等电点，试试调节一下pH值或是改变一下缓冲液的离子浓度。

不积跬步无以至千里！

13楼2015-02-01 09:35:23

zzlei

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引用回帖:

7楼: Originally posted by lxgnh166 at 2015-01-30 08:51:58
你的PH是多少，每个蛋白都有个合适的PH,PH不合适回导致沉淀，NI层析你也可以考虑PH梯度洗脱。

Hepes 7.5，以前师兄都用这个做的，能做出来，我一做就沉淀了

14楼2015-02-01 09:47:36

zzlei

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引用回帖:

13楼: Originally posted by pengyun2521 at 2015-02-01 09:35:23
目的蛋白沉淀与离子浓度和pH都有一定的关系，你可以看看目的蛋白的等电点，试试调节一下pH值或是改变一下缓冲液的离子浓度。

求解怎么知道蛋白的等电点？我蛋白都纯化不出来怎么测

15楼2015-02-01 10:14:17

zzlei

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引用回帖:

现在问题是师兄他们做出来的不沉淀，我做了好几次都沉淀了。。。有点怀疑自己操作哪儿出问题了。。。是挑菌时粘了太多固体培养基？还是超声？我觉得可能是我在纯化的某个步骤就把蛋白弄的变性了。。。但又不知道是哪步出了问题。。。现在真真切切的觉得自己不是做科研的料，但老板又对我抱有很大期望，我得拼命努力，脑子笨又学不好。。。纠结。我原本是化学出身，生物这边真是现学现弄，很多都搞不懂

16楼2015-02-01 10:19:20