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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » M.SssI 甲基转移酶
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yanzihuaxue

铜虫 (小有名气)

[求助] M.SssI 甲基转移酶 已有4人参与

有哪位大神用过M.SssI 甲基转移酶，请问甲基化时有什么特殊要求吗，为什么我的链甲基化不上
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1楼 2015-01-26 16:48:20
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yanzihuaxue: 金币+2 2015-01-26 19:51:41
1.在50 µl 推荐的反应缓冲液中，37°C 反应15分钟，1 µl M.SssI保护1 µg 基因组 DNA 不被HpaII消化。
把反应时间加长一些；
2 储存在 -20°C，是不是降解了啊？
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2015-01-26 17:11:18
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yanzihuaxue

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-26 17:11:18
1.在50 µl 推荐的反应缓冲液中，37°C 反应15分钟，1 µl M.SssI保护1 µg 基因组 DNA 不被HpaII消化。
把反应时间加长一些；
2 储存在 -20°C，是不是降解了啊？

买的是NEB的酶，在-20℃储存的，就是在推荐的NEB buffer 2 中反应，反应了两个小时，但是没有甲基化上，心塞呀，不知道怎么办了
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3楼2015-01-26 19:53:48
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yanzihuaxue at 2015-01-26 19:53:48
买的是NEB的酶，在-20℃储存的，就是在推荐的NEB buffer 2 中反应，反应了两个小时，但是没有甲基化上，心塞呀，不知道怎么办了...

能不能是酶运输过程中就是降解了啊？
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
4楼2015-01-26 19:57:08
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yanzihuaxue

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-26 19:57:08
能不能是酶运输过程中就是降解了啊？...

不能吧，这个酶很容易降解吗？试剂公司不能这么不靠谱吧
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5楼2015-01-26 21:08:50
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人
引用回帖:
5楼: Originally posted by yanzihuaxue at 2015-01-26 21:08:50
不能吧，这个酶很容易降解吗？试剂公司不能这么不靠谱吧...

运输过程加干冰还行
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
6楼2015-01-26 21:16:15
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xiaoguo521

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好，想问下你甲基化转移酶在哪个公司买的啊？谢谢了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2015-04-07 01:58:12
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科研小狗

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您的甲基化最后做出来了吗？求教，感激涕零   实在甲基化不上，不知道原因，在此先谢谢前辈了！

发自小木虫Android客户端
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8楼2017-06-25 22:52:41
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ptpt1234

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问做出来了么前辈，我的也是甲基化不上，其实都不知道是否甲基化，因为每次做的现象都不一样，很心塞。而只做加切酶的却不会这样
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9楼2018-06-06 09:16:46
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ptpt1234

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 科研小狗 at 2017-06-25 22:52:41
您的甲基化最后做出来了吗？求教，感激涕零   实在甲基化不上，不知道原因，在此先谢谢前辈了！

请问前辈做出来了么
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10楼2018-06-06 09:18:03
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