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yanzihuaxue

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[求助] M.SssI 甲基转移酶已有4人参与

有哪位大神用过M.SssI 甲基转移酶，请问甲基化时有什么特殊要求吗，为什么我的链甲基化不上

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1楼 2015-01-26 16:48:20

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飞约疯人院

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【答案】应助回帖

★ ★
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yanzihuaxue: 金币+2 2015-01-26 19:51:41

1.在50 µl 推荐的反应缓冲液中，37°C 反应15分钟，1 µl M.SssI保护1 µg 基因组 DNA 不被HpaII消化。
把反应时间加长一些；
2 储存在 -20°C，是不是降解了啊？

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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。

2楼2015-01-26 17:11:18

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yanzihuaxue

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-26 17:11:18
1.在50 µl 推荐的反应缓冲液中，37°C 反应15分钟，1 µl M.SssI保护1 µg 基因组 DNA 不被HpaII消化。
把反应时间加长一些；
2 储存在 -20°C，是不是降解了啊？

买的是NEB的酶，在-20℃储存的，就是在推荐的NEB buffer 2 中反应，反应了两个小时，但是没有甲基化上，心塞呀，不知道怎么办了

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3楼2015-01-26 19:53:48

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