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aimed

铜虫 (小有名气)

[求助] 检测三七中皂苷成分 HPLC/UV 已有1人参与

第一张照片是样品，第二张是甲醇溶剂。流动相是75乙腈和25水，203nm。峰与峰之间分不开，样品出峰这么快啊？求大神指导

检测三七中皂苷成分  HPLC/UV
样品


检测三七中皂苷成分  HPLC/UV-1
甲醇
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1楼 2015-01-24 15:01:27
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lovedich

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
乙腈的比例应该是25才对吧，75乙腈出峰肯定很快的，测三七皂苷不会用到这么大比例乙腈。
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2楼2015-01-24 21:34:36
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aimed

铜虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by lovedich at 2015-01-24 21:34:36
乙腈的比例应该是25才对吧，75乙腈出峰肯定很快的，测三七皂苷不会用到这么大比例乙腈。

用的就是75的乙腈，，我也不知道什么情况。用的等度洗脱。梯度设置一般怎么设置啊？求指导
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3楼2015-01-26 08:43:08
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药剂天下ing

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by aimed at 2015-01-26 08:43:08
用的就是75的乙腈，，我也不知道什么情况。用的等度洗脱。梯度设置一般怎么设置啊？求指导...

岛津工作站如果是中文版本（看你的应该是），在仪器参数那块有个时间程序，在里面设置梯度洗脱程序
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4楼2015-01-26 10:38:09
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aimed

铜虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 药剂天下ing at 2015-01-26 10:38:09
岛津工作站如果是中文版本（看你的应该是），在仪器参数那块有个时间程序，在里面设置梯度洗脱程序...

我的意思是说，从这个图看，怎么设置梯度，而不是操作。我一直在改，但是效果还不是太好。怎么设置呢
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5楼2015-01-26 14:26:57
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药剂天下ing

新虫 (初入文坛)
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5楼: Originally posted by aimed at 2015-01-26 14:26:57
我的意思是说，从这个图看，怎么设置梯度，而不是操作。我一直在改，但是效果还不是太好。怎么设置呢...

首先，确定色谱柱为RP，那么初始ACN比例应该低些，从你这张图上来看，唯一不好分离的就是5 min左右的两个色谱峰。其实可以用等度，50%ACN也许就能分开，否则降低ACN比例，直到分开为止。
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6楼2015-01-26 17:23:56
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aimed

铜虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 药剂天下ing at 2015-01-26 17:23:56
首先，确定色谱柱为RP，那么初始ACN比例应该低些，从你这张图上来看，唯一不好分离的就是5 min左右的两个色谱峰。其实可以用等度，50%ACN也许就能分开，否则降低ACN比例，直到分开为止。...

样品中的溶剂峰和单独跑溶剂峰，两个峰的强度是不是相同的呢？
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7楼2015-01-27 09:11:46
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aimed

铜虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 药剂天下ing at 2015-01-26 17:23:56
首先，确定色谱柱为RP，那么初始ACN比例应该低些，从你这张图上来看，唯一不好分离的就是5 min左右的两个色谱峰。其实可以用等度，50%ACN也许就能分开，否则降低ACN比例，直到分开为止。...

我之前自己设置了一个梯度下面的这个图，都是在40分钟之后出的峰，并且40min后乙腈的浓度在40％，最大到达75％。前面没峰，所以我用了75乙腈等度洗脱试试。
检测三七中皂苷成分  HPLC/UV-2
梯度.jpg
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8楼2015-01-27 09:34:17
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