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新虫 (正式写手)

[交流] 离子交换层析 低盐浓度长时间和高盐浓度短时间 是否相同 已有2人参与

请教一个问题:
在离子交换层析的过程中,很常见的是,用一个线性梯度找到大致洗脱目的蛋白的盐浓度范围,随后再进行细细调整。那么问题来了,比如,会发现在100mM 的NaCl脱下来一些,用150mM的浓度也能洗脱下来一些,在200或者更高的浓度也能洗脱,请问,为什么呢,不应该是一个浓度点而非一个范围洗脱下来么?用低盐浓度长时间和高盐浓度短时间是否能达到效果一致呢?
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董博士

金虫 (正式写手)


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一般洗脱液浓度越大,洗脱下目的蛋白越多,但是到一定的浓度会达到饱和,即交换离子数量达到最大,因此洗脱蛋白会有一个饱和临界浓度,一般洗脱的时候选择这个浓度。
医学&统计学
2楼2015-01-25 14:59:59
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新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 董博士 at 2015-01-25 14:59:59
一般洗脱液浓度越大,洗脱下目的蛋白越多,但是到一定的浓度会达到饱和,即交换离子数量达到最大,因此洗脱蛋白会有一个饱和临界浓度,一般洗脱的时候选择这个浓度。

谢谢。请问,低洗脱长时间洗脱会把目的蛋白全部洗脱下来吗?低浓度长时间和中浓度较短时间及饱和浓度短时间的洗脱效果一样吗?
3楼2015-01-26 18:16:25
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hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
低浓度长时间洗脱和高浓度短时间洗脱效果不一样,低浓度长时间洗脱,洗脱的蛋白很稀,高浓度短时间洗脱,洗的蛋白浓度高也可以起到浓缩的目的。但是直接用高浓度洗可能会把其他杂志也洗下来,所以要综合,看你那个浓度洗的蛋白纯度最高了。祝顺利。
4楼2015-08-28 16:10:51
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