应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 使用酵母双杂交方法构建稳转细胞用于化合物高通量筛选求助GAL4原理
41/1返回列表
查看: 1211  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

五角亭

金虫 (正式写手)

[求助] 使用酵母双杂交方法构建稳转细胞用于化合物高通量筛选求助GAL4原理 已有1人参与

本人打算做某一靶点的稳转细胞，想通过酵母双杂交系统进行构建，以用于筛选该靶点的活性化合物，现在碰到的问题是，将该靶同GAL4-DNA binding domain 连接构建成重组质粒，另一个质粒如何插入VP16-Luciferase,欢迎各位大侠，提些宝贵意见，不吝感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
捉虫
1楼 2015-01-21 10:44:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:03:34
酵母双杂交应该体系应该很成熟了，我觉得你可以看看文献或者找一个protocol看看。
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-21 10:52:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

五角亭

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-21 10:52:03
酵母双杂交应该体系应该很成熟了，我觉得你可以看看文献或者找一个protocol看看。

谢谢，大兵，文献中都是GAL4-DBD+目标蛋白，与PG5Luc报告质粒共转染，是不是就不需要VP16，只要GAL4结合到DNA结合部位，就可激活报告基因表达，有经验的虫友们，欢迎跟帖哈，谢谢！
赞一下 回复此楼
捉虫
3楼2015-01-23 08:13:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

447674

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 五角亭 at 2015-01-23 08:13:23
谢谢，大兵，文献中都是GAL4-DBD+目标蛋白，与PG5Luc报告质粒共转染，是不是就不需要VP16，只要GAL4结合到DNA结合部位，就可激活报告基因表达，有经验的虫友们，欢迎跟帖哈，谢谢！...

亲可以共享一下gal4-DBD的质粒给小弟吗？
赞一下 回复此楼
4楼2017-03-25 22:06:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 五角亭 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭