| 查看: 2189 | 回复: 15 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
重组质粒转到BL21（DE3）中用T7检测没条带，用特异引物检测有条带，怎么回事 已有5人参与
|
||
| 在做原核表达，构建的重组质粒pET-32a-L，双酶切大小正确，重组质粒用T7还有特异性引物检测都正确！但是转化到BL21(DE3)的时候长了满板的菌，挑了十个菌，用T7检测没有一个有条带，但是用特异引物检测都有，到底哪里出了问题？？？？后面换了别人做的感受态转化，结果两个板只长了一颗菌，怎么破？求各位大神指点，小女子不胜感激 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有128人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
10楼2015-01-21 10:55:35
781055707
木虫 (著名写手)
- 应助: 291 (大学生)
- 金币: 3118.2
- 散金: 46
- 红花: 19
- 帖子: 2030
- 在线: 579.3小时
- 虫号: 3046113
- 注册: 2014-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ginnyzhuzhu: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-01-21 11:09:18
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:15:36
感谢参与，应助指数 +1
ginnyzhuzhu: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-01-21 11:09:18
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 21:15:36
| （用T7检测没有一个有条带，但是用特异引物检测都有），特异引物检测阴性有条带吗？没有的话，应该是连上了，可以提个质粒，双切验证一下，T7的引物坏了也是有可能的。BL21(DE3)这个感受态连上后，我的基本长的都很稀疏。二，三十个菌左右吧。（后面换了别人做的感受态转化，结果两个板只长了一颗菌，怎么破？）妥妥的没连上，有做没酶切的质粒转这个感受态吗？ |
2楼2015-01-21 10:16:13
3楼2015-01-21 10:25:07
4楼2015-01-21 10:28:27
6