应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 定量PCR
51/1返回列表
查看: 1255  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)

[求助] 定量PCR 已有10人参与

各位大神，我最近在做定量PCR，是个新手，遇到了一些问题，拜托各位指点！我的实验扩增曲线没有出现平台期，请问这是怎么回事？

定量PCR
扩增曲线.jpg


定量PCR-1
熔解曲线.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-01-15 12:46:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhangyunjing at 2015-01-15 14:53:08
跟试剂盒有关，同时也跟你扩增的片段有关，有些试剂盒以gDNA为模板，有些片段就是没有平台期，如果以质粒或者cDNA为模板，就有平台期了。你可以试试质粒为模板做一下，应该有平台期的。

但是我做的绝对定量，要直接要样品DNA，不能是质粒里面的
赞一下 回复此楼
9楼2015-01-15 14:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-15 18:06:34
明显循环数太少，才35个，曲线刚刚抬头还没到平台期，建议增加循环数到45个。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-15 13:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-15 13:02:54
明显循环数太少，才35个，曲线刚刚抬头还没到平台期，建议增加循环数到45个。

但是循环数增加后会出现非特异性扩增
赞一下 回复此楼
3楼2015-01-15 13:29:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

494118250

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-15 18:06:53
模板浓度太低了，建议减少稀释倍数
赞一下 回复此楼
4楼2015-01-15 13:30:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭