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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 作物 » 植物内源激素的提取方法
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dong_yue

金虫 (小有名气)

[求助] 植物内源激素的提取方法 已有1人参与

各位同仁，我最近在做甘薯内源激素的提取及定量，
看到一篇nature protocol上的文章Pan, X. Welti, R. Wang, X. Quantitative analysis of major plant hormones in crude plant extracts by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry
此文详细介绍了植物内源激素的提取及定量方法，不知哪位看过或做过，
我想问的是在提取植物激素的过程中为什么要加入内标？
此外这个提取植物内源激素的方法回收率怎么样，
最终的浓度通过液相能够检测出来吗？还是必须打质谱才行？




他的方法是：植物组织样品液氮速冻→研磨→称取50mg样品→加50μl内标工作液→加500μl提取液→100rpm，4℃震荡30min→加1ml CH2CL2→4℃震荡30min→13000g，4℃离心5min→取下层液，液氮吹干→100μl甲醇重悬→质谱检测
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1楼 2015-01-14 09:48:58
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yulanyunyan

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们的方法是：
植物组织样品液氮速冻→研磨→称取200mg样品→加1ml带有内标的提取液乙酸乙酯→震荡10min后4℃离心→取上清蒸发器蒸干→加入600ul的70%的甲醇→4℃震荡10min→15000g，4℃离心20min→取上层液400ul，加入160ul双蒸水使得最后甲醇的浓度是50%→质谱检测
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努力付出，无怨无悔！
2楼2015-10-22 11:32:01
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WMM王明

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yulanyunyan at 2015-10-22 11:32:01
我们的方法是：
植物组织样品液氮速冻→研磨→称取200mg样品→加1ml带有内标的提取液乙酸乙酯→震荡10min后4℃离心→取上清蒸发器蒸干→加入600ul的70%的甲醇→4℃震荡10min→15000g，4℃离心20min→取上层液400ul ...

敢问阁下提的是什么激素，效果怎样
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3楼2016-01-15 11:57:09
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