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dong_yue

金虫 (小有名气)

[求助] 植物内源激素的提取方法已有1人参与

各位同仁,我最近在做甘薯内源激素的提取及定量,
看到一篇nature protocol上的文章Pan, X. Welti, R. Wang, X. Quantitative analysis of major plant hormones in crude plant extracts by high-performance liquid chromatography-mass spectrometry
此文详细介绍了植物内源激素的提取及定量方法,不知哪位看过或做过,
我想问的是在提取植物激素的过程中为什么要加入内标?
此外这个提取植物内源激素的方法回收率怎么样,
最终的浓度通过液相能够检测出来吗?还是必须打质谱才行?




他的方法是:植物组织样品液氮速冻→研磨→称取50mg样品→加50μl内标工作液→加500μl提取液→100rpm,4℃震荡30min→加1ml CH2CL2→4℃震荡30min→13000g,4℃离心5min→取下层液,液氮吹干→100μl甲醇重悬→质谱检测
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yulanyunyan

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们的方法是:
植物组织样品液氮速冻→研磨→称取200mg样品→加1ml带有内标的提取液乙酸乙酯→震荡10min后4℃离心→取上清蒸发器蒸干→加入600ul的70%的甲醇→4℃震荡10min→15000g,4℃离心20min→取上层液400ul,加入160ul双蒸水使得最后甲醇的浓度是50%→质谱检测
努力付出,无怨无悔!
2楼2015-10-22 11:32:01
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WMM王明

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yulanyunyan at 2015-10-22 11:32:01
我们的方法是:
植物组织样品液氮速冻→研磨→称取200mg样品→加1ml带有内标的提取液乙酸乙酯→震荡10min后4℃离心→取上清蒸发器蒸干→加入600ul的70%的甲醇→4℃震荡10min→15000g,4℃离心20min→取上层液400ul ...

敢问阁下提的是什么激素,效果怎样
3楼2016-01-15 11:57:09
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