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taishuai2004

[交流] 5‘RACE 通用引物 单引物扩增

最近用SMART的盒子做5'RACE,发现总是有很多条带;把UPM单独放进去,不放特异引物,发现在1000左右有一条非常亮的带,发生单引物扩增。不知道各位虫友遇到过这样的问题没有,是如何解决的?
谢谢了!
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maylink

铜虫 (小有名气)

我跑的是touchdown PCR,温度再怎么提高呢,望高手指点啊!
11楼2008-06-18 23:06:32
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yangym1123

木虫 (小有名气)

我也是在做RACE,经常得到单引物扩增的条带,不知道怎么解决呢!
2楼2008-06-01 17:18:23
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greenspringmi

银虫 (正式写手)

试试提高退火温度
3楼2008-06-01 20:59:23
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lufuhao

木虫 (著名写手)

极品木虫

★
lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):这个可能性是比较大的,谢谢
不是吧,引物设计得不好吗?
建议:多设计几条引物试一试,那么贵的试剂盒都买了,也不在乎几条引物的钱!
        还有扩增不出来条带应该改变一下退火温度试一试!
      我做的Clontech的SMART,没有遇到异常!做了两次了
将心比心
4楼2008-06-01 21:17:58
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