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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 5‘RACE 通用引物 单引物扩增
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taishuai2004

[交流] 5‘RACE 通用引物 单引物扩增

最近用SMART的盒子做5'RACE，发现总是有很多条带；把UPM单独放进去，不放特异引物，发现在1000左右有一条非常亮的带，发生单引物扩增。不知道各位虫友遇到过这样的问题没有，是如何解决的？
谢谢了！
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1楼 2008-06-01 14:09:40
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yangym1123

木虫 (小有名气)
我也是在做RACE，经常得到单引物扩增的条带，不知道怎么解决呢！
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2楼2008-06-01 17:18:23
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greenspringmi

银虫 (正式写手)
试试提高退火温度
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3楼2008-06-01 20:59:23
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lufuhao

木虫 (著名写手)

极品木虫
★
lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):这个可能性是比较大的，谢谢
不是吧，引物设计得不好吗？
建议：多设计几条引物试一试，那么贵的试剂盒都买了，也不在乎几条引物的钱！
        还有扩增不出来条带应该改变一下退火温度试一试！
      我做的Clontech的SMART，没有遇到异常！做了两次了
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将心比心
4楼2008-06-01 21:17:58
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zhyl1984

金虫 (正式写手)
我是P不出带来，真想你給我一条带
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5楼2008-06-02 18:17:01
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taishuai2004

呵呵  怎么办啊
还是没结果
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6楼2008-06-03 08:46:39
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taishuai2004

我决定重新设计引物了
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7楼2008-06-03 08:47:18
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ice-2008

金虫 (小有名气)
换一种方法试试吧，我也遇到过这种情况，曾经咨询过公司的人，答复是“如果特异引物引起单引物扩增，就重新设计引物；如果通用引物出现单引物扩增，就改变方法”
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8楼2008-06-16 07:56:31
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taishuai2004

呵呵 我的基因终于克隆出来了
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9楼2008-06-17 17:47:31
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superarm

金虫 (正式写手)
克隆基因还用试剂盒啊，我都用土办法，最多几百块搞定了，随便克隆
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与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋！
10楼2008-06-17 22:02:24
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