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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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taishuai2004

[交流] 5‘RACE 通用引物 单引物扩增

最近用SMART的盒子做5'RACE,发现总是有很多条带;把UPM单独放进去,不放特异引物,发现在1000左右有一条非常亮的带,发生单引物扩增。不知道各位虫友遇到过这样的问题没有,是如何解决的?
谢谢了!
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yangym1123

木虫 (小有名气)

我也是在做RACE,经常得到单引物扩增的条带,不知道怎么解决呢!
2楼2008-06-01 17:18:23
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greenspringmi

银虫 (正式写手)

试试提高退火温度
3楼2008-06-01 20:59:23
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lufuhao

木虫 (著名写手)

极品木虫


lixiaoyi1981(金币+1,VIP+0):这个可能性是比较大的,谢谢
不是吧,引物设计得不好吗?
建议:多设计几条引物试一试,那么贵的试剂盒都买了,也不在乎几条引物的钱!
        还有扩增不出来条带应该改变一下退火温度试一试!
      我做的Clontech的SMART,没有遇到异常!做了两次了
将心比心
4楼2008-06-01 21:17:58
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zhyl1984

金虫 (正式写手)

我是P不出带来,真想你給我一条带
5楼2008-06-02 18:17:01
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taishuai2004

呵呵  怎么办啊
还是没结果
6楼2008-06-03 08:46:39
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taishuai2004

我决定重新设计引物了
7楼2008-06-03 08:47:18
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ice-2008

金虫 (小有名气)

换一种方法试试吧,我也遇到过这种情况,曾经咨询过公司的人,答复是“如果特异引物引起单引物扩增,就重新设计引物;如果通用引物出现单引物扩增,就改变方法”
8楼2008-06-16 07:56:31
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taishuai2004

呵呵 我的基因终于克隆出来了
9楼2008-06-17 17:47:31
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superarm

金虫 (正式写手)

克隆基因还用试剂盒啊,我都用土办法,最多几百块搞定了,随便克隆
与分子生物学的同仁一起遨游科学的海洋!
10楼2008-06-17 22:02:24
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