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lxl0708

铜虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量时ct值40以后还没起峰但有溶解曲线 是什么原因?已有17人参与

荧光定量时目的基因ct值40以后还没起峰但有溶解曲线 是什么原因?怎么处理呀, 内参正常
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活出自己
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拾玖

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

首先确定你的目的基因引物没问题   可以先用普通pcr试试  调调温度等条件
  若果引物没问题  你的内参CT在20左右  你的目的基因到40还没出峰  那就是你的目的基因表达量太低了  一般来说就不用做了  如果你的内参CT也比较大 在30左右  那就很有可能是你模板太低 可以把模板提高试试
16楼2015-10-23 17:39:54
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xiaoyugutou

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-07 16:44:56
Double check your target gene primer, if it is OK, maybe your target gene has a really low expression abundance.
2楼2015-01-07 06:03:15
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-01-07 16:45:00
目的基因量太少,你确定溶解曲线的峰不是引物二聚体吗?
3楼2015-01-07 08:53:33
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sicilia189

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果引物设计没有问题的话,应该是目的基因表达量过低。
4楼2015-01-15 00:03:59
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