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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 基因敲除、互补、功能研究等实验怎么做？
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zcz772170623

铜虫 (小有名气)

[交流] 基因敲除、互补、功能研究等实验怎么做？

本人研究生，做黄单胞，在通过Tn5构建转化子库之后，通过致病力筛选、Tail-PCR获得侧翼序列、比对获得全基因之后，将几个可能与致病力相关的基因做了敲除，现在正在构建互补载体，已经做了敲除转化子的胞外酶活性测定、胞外多糖分泌测定、生长曲线、致病性测定等等，不过不知道将互补做完了之后还有什么可以做的。根据其他研究生、博士生等的毕业论文发现，基本也就是做这些：互补之后观察致病力变化，然后讨论可能性。
有些厉害的还做了蛋白，不过比较少，没怎么看懂，实验室做蛋白比较少。那我假如想继续往下做，除了互补可以做哪些？而且老板经常说做的太少，但是感觉分子实验没有太大的量，像现在构建载体，然后验证，然后点击互补，然后再验证，然后做个Southern，感觉就差不多了。
看的文献不够广，懂的也不多，请各位前辈大牛指教，交流下怎么这个实验路线怎么设计，怎样可以做好做深。
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1楼 2015-01-05 15:48:27
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混合配搭

新虫 (小有名气)
★
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你好，基因敲除的载体怎么构建啊？都需要什么啊？
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56楼2015-10-20 16:18:59
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