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15269179761

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于肿瘤药物处理的问题 已有1人参与

本人刚开始进入实验阶段,很多东西都处于空白阶段。我的实验大体是做药物对肿瘤细胞影响的,现在遇到的问题是,我要用药物处理细胞,接下来就需要分析一些相关基因的表达,还有蛋白表达的情况。我现在不太明白,如果我的药是抑制细胞增殖的,那我处理细胞的时候是选择多大的药物浓度,如果选择抑制能力最强的浓度,那最后分析基因表达的时候或者做WB的时候,有死细胞不会对结果造成影响么,会不会分不清到底细胞死亡造成与对照的表达差异还是药物本身能够影响到肿瘤细胞蛋白基因的表达。忘各位大神不要笑我,我刚开始做。
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chenweijlu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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15269179761: 金币+2, 有帮助 2015-01-08 14:11:54
嘿嘿 真是新手啊 ,你确定的这个浓度最终不会只是一个浓度的,最少也是有3个啊要不你paper 怎么上结果, 既然要做增殖抑制那MTT,XTT哪些的肯定要先做出来确定药物对这个细胞的IC50或是存活率吧,然后一般选在IC50以下的3个浓度做后续mRNA和protein,这方面文章很多,至于你说的死细胞的问题,哎,真不是问题,一般提取细胞蛋白前都会PBS洗细胞培养孔的,死细胞培养基什么的,就影响很低了
2楼2015-01-06 13:27:13
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