24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 872  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sxtx0607

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] PCR产物严重拖尾

我在做PCR时出现严重拖尾现象,不知道是怎么回事,请高手指点
   我的目的片段大约为100bp,利用的反应体系如下:
94 度,4分钟
94 度     30 秒
60 度    30 秒
72  度   30 秒   
30个循环
72 度10分钟
回复此楼

» 猜你喜欢

111111
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lybio

金虫 (正式写手)

要扩增的PCR长度过短,你可以先P含有此段基因较长的DNA片段,然后再以它为模板,进一步PCR,可以减少非特异片段
6楼2008-06-03 19:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

Sanger882

银虫 (小有名气)

楼主最好上个电泳图,才可能作出正确的判断,
       还有就是不知道你的引物序列如何?
   一般来说可通过如下途径减少拖带:
     1:模板量加多了,适当减少
     2:适当提高退火温度
     3:增加循环数(35循环试试)
     4:减少酶量(25UL体系加1.5ULtaq就可以了)
     5:100bp的片段根本就无需30 秒延伸的,10秒足矣。
信念之火一旦燃烧,再大的暴风雨也无法阻挡!
2楼2008-05-29 18:58:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

playboy723

金虫 (正式写手)

模板的问题    可能是模板降解了    提高点退火温度也会好些
3楼2008-05-29 21:07:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dk83078

新虫 (初入文坛)

遇到过,期待着你们的问题解决呢
4楼2008-05-31 13:31:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +7 15188958825 2026-03-25 7/350 2026-03-29 01:15 by 544594351
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +7 1428151015 2026-03-27 7/350 2026-03-28 19:58 by S240
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +4 26要上岸 2026-03-28 4/200 2026-03-28 15:30 by 1018329917
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 4/200 2026-03-28 14:30 by QiMing7
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +6 脚滑的守法公民 2026-03-27 6/300 2026-03-28 11:02 by gjlllb
[考研] 085602 307分 求调剂 +7 不知道叫什么! 2026-03-26 7/350 2026-03-28 09:57 by 神马都不懂
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕,求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见