应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 小白求助纯化酶经验
404/4返回列表上一页1234
查看: 2079  |  回复: 39
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
31楼2015-01-04 00:37:14
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
31楼: Originally posted by xcs100 at 2015-01-04 00:37:14
哦哦哦。DEAE 和 Q 原来是这个道理啊。
您别奇怪，菌株是一直定着的，用于其它用途，同时呢，又要研究一下它所产酶的酶学性质，所以就得纯化。
嗯，您说得对，新菌株所产酶差异一般还是比较大的。也得有个探索， ...

这个菌株会产胞外的脂肪酶吗，为什么要做胞内的？
不管是不是新菌株，所产的酶的酶学性质都是很难说是不是跟已有报道的一样的，不能肯定其纯化流程是怎样的。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
32楼2015-01-04 01:03:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
33楼2015-01-04 01:17:58
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
33楼: Originally posted by xcs100 at 2015-01-04 01:17:58
基本上只产胞内酶。好的，先借鉴经验缩小一下预方案的范围，不然瞎整、各种条件全都摸也不是个事儿。唉，首先本来就是个小白，还有就是客观条件也有点不是特别在行这方面，幸好还有你们这些人不断指点，（只是不知 ...

预装柱最好是和纯化仪配套使用，你说的柱子是空柱？我们实验室已经有了，我没买过，你得自己查。你当初怎么确定它只产胞内酶的？胞内酶的话，纯化起来跟胞外酶差不多的，就是最初的产量和破碎方面我不了解。金币方面我不缺，你得问版主是不是发帖的时候还要注意设置什么的。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
34楼2015-01-04 01:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
35楼2015-01-04 01:41:24
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
35楼: Originally posted by xcs100 at 2015-01-04 01:41:24
嗯 好的。我这几天查了，纯化仪器（国产）的信息，明天元旦回来应该上班了，电话问一下。我要想买的柱子是空柱子。哦，我看的文献胞内酶纯化好像麻烦多一下，比如遇到膜蛋白了就。。。
要学的东西还很多，谢谢你们 ...

AKTA的纯化仪印象中最少的都应该要20万了，还得过海关，和预装柱配套使用的，得卖预装柱，可能赶不及。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
36楼2015-01-04 01:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
37楼2015-01-04 01:52:27
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

伯信生物-Sam

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
内容已删除
回复此楼
38楼2015-06-25 22:13:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圆圈爱圈圆

银虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
13楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-12-31 00:58:31
蛋白质纯化实验方案与应用

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6307126&fpage=1&target=blank

此书卤煮可以参考。

现在看不到这个链接了，可以麻烦私给一个链接么
赞一下 回复此楼
老师让我用小木虫看文献，而我却来看段子
39楼2017-06-30 10:30:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
传统方法比较粗，纯化后仍然有杂组分，而且收率低。是要用分离介质来分离的。建议你其实可以多买些填料，量大了还便宜，你100ml就700多是贵了些。DEAE FF一升才2000多，方便你后面你的中式和放大。另外填料装柱后用完可以再生重复使用的，卖家说明书里面有详细的再生方法。离子交换和疏水一个是根据组分电荷差异特点来分离，一个是根据组分的疏水差异来分离。要注意的是缓冲液的pH要适宜酶活性，要在填料的pH范围，还有就是盐浓度的选择。要得到较好的分离效果，这两个的选择是需要实验摸索的，每个样品情况都不相同，但缓冲液的类型基本类似。装柱不要产生气泡，缓冲液和样品都做脱气处理，充分平衡柱子，充分洗杂，梯度洗脱，柱子再生，这些是基本的。
赞一下 回复此楼
40楼2017-08-02 11:02:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xcs100 的主题更新
404/4返回列表上一页1234
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 材料专硕306英一数二 +4 z1z2z3879 2026-03-16 6/300 2026-03-16 19:38 by z1z2z3879
[考研] 化学调剂0703 +8 啊我我的 2026-03-11 8/400 2026-03-16 17:23 by 我的船我的海
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] 327求调剂 +4 Ffff03 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:17 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀！ 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭