应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 转染求助
51/1返回列表
查看: 949  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wszjll

木虫 (正式写手)

[求助] 转染求助

我从公司购买了一个过表达的质粒载体，这个载体的ORF对应的是某一个膜受体。我是想通过共聚焦显微镜看这个过表达的受体位置是否会在膜上和胞浆中发生位置变换，现在有很多问题不懂，想请教各位大侠指点一二。质粒载体如附件所述，这个质粒貌似没有限制酶切位点，不知能不能做稳定转染？如果不能做稳定转染只做瞬转能满足我的要求吗？还有就是这个质粒如果不整合到染色体中，它在细胞中能表达吗？表达所需要的酶啊，底物啊等等从哪里来的？新手，别取笑哦！感谢！
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : pReceiver-M98质粒图谱.pdf
    • 2014-12-27 17:07:13, 77.84 K

» 猜你喜欢
1楼 2014-12-27 17:21:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wszjll

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xuzhu598 at 2014-12-27 21:18:54
1.瞬转应该可以满足实验
2.一定要stable line的话，可以在你的ORF, neomycin之外找个酶切位点将质粒线性化，然后转进细胞，用G418筛选。不过我直接转质粒进去也做过stable line，也可以不用线性化。
3.不整合进基 ...

谢谢
回复此楼
3楼2014-12-27 22:07:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wszjll: 金币+25, ★★★很有帮助, 问题解释很清楚，对我帮助很大，万分感谢 2014-12-30 09:16:23
1.瞬转应该可以满足实验
2.一定要stable line的话，可以在你的ORF, neomycin之外找个酶切位点将质粒线性化，然后转进细胞，用G418筛选。不过我直接转质粒进去也做过stable line，也可以不用线性化。
3.不整合进基因组也是可以表达的，就是正常的转录和翻译。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-12-27 21:18:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +6 YXCT 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:21 by 向上的胖东
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 材料学调剂 +9 提神豆沙包 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:15 by ms629
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭