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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 羟基胶乳微球偶联抗体 EDC
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tt2019jy

木虫 (正式写手)

[求助] 羟基胶乳微球偶联抗体 EDC 已有1人参与

各位大侠，我做这个反应已经半个月了，到现在还是一无所获。请知道的了解的大侠给点意见吧，我做的反应是这样的过程：
1 微球在MES缓冲液中（PH6.1）与EDC和sulfo-NHS室温震荡15mins；（看了很多资料和帖子，想提一个问题，到底是由沉淀的反应好还是没有沉淀产生的反应好？谢谢了）
2 收集1反应生成的微球与抗体在室温反应2小时，淬灭，洗涤，悬浮；（我查了文献只看见EDC和sulfo-NHS活化羧基的，EDC和sulfo-NHS能不能活化羟基？反应2能不能发生？谢谢）
3 取2悬浮液进行分析，发现悬浮液与血清和水均有反应度。（这种情况是怎么回事？请知道的同行指点指点吧，谢谢了）
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羧基活化EDC|DCC,NHS

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TT
1楼 2014-12-24 08:44:20
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

tt2019jy

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by scqing at 2015-01-06 10:08:37
EDC活化羧基的多，活化羟基的还真没见过，但现在又一步法可以做，直接可以偶联抗体。而且活性在有机相中很稳定。

前辈有没有相关文献，如果不涉及泄密的话就请给我一篇吧，谢谢了！jx05jxt@126.com，不管是一步法两步法，我现在就是希望能看到产品。自己做出来的产品不是没有反应度就是和水与血清都有反应度，痛苦啊！再次感谢！
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TT
3楼2015-01-15 15:43:53
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jiajia1221

金虫 (小有名气)
我也是才开始做，一点反应都没有，遇到和楼主一样的问题，到底加EDC之后应该是什么状态？
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6楼2015-04-02 10:33:26
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scqing

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
tt2019jy: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-01-06 10:49:57
EDC活化羧基的多，活化羟基的还真没见过，但现在又一步法可以做，直接可以偶联抗体。而且活性在有机相中很稳定。
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2楼2015-01-06 10:08:37
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doveyido

新虫 (初入文坛)
EDC可能不能活化羟基吧 与抗体偶联之后可以离心 测测上清的蛋白浓度 看看是否有偶联上去
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4楼2015-01-30 16:41:39
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youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)
放弃吧，少年。羟基只是用来提供电荷，稳定胶体体系。非要偶联的话，也是被动吸附。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2015-03-25 09:06:32
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qqsheshou

新虫 (初入文坛)
抗体与MES胶乳偶联很简单，只是稳定性差。
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7楼2015-06-03 16:54:42
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youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)
关于（1），有轻微沉淀，属正常现象，但没有最好。
关于（2），偶联反应可以发生，但需要调节好EDC／NHS的量，使羧基充分活化。
关于（3），还有多多余的抗体没有偶联上去，属于正常现象。只要摸索好偶联上去的量就可以了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2015-09-17 17:28:09
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fj89lana

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by youjihuaxue2000 at 2015-09-17 17:28:09
关于（1），有轻微沉淀，属正常现象，但没有最好。
关于（2），偶联反应可以发生，但需要调节好EDC／NHS的量，使羧基充分活化。
关于（3），还有多多余的抗体没有偶联上去，属于正常现象。只要摸索好偶联上去的量 ...

羧基聚苯乙烯微球用EDAC与NHS偶联抗体，当时没出现沉淀，但隔夜后出现沉淀是什么原因？而且沉淀量很大，上下分层
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9楼2016-01-13 13:45:33
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ayiyaya

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by fj89lana at 2016-01-13 13:45:33
羧基聚苯乙烯微球用EDAC与NHS偶联抗体，当时没出现沉淀，但隔夜后出现沉淀是什么原因？而且沉淀量很大，上下分层...

我也是有这个问题，正在各种调整，可是效果并不明显，不知道你有没有解决这个问题？？？
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10楼2016-04-06 16:48:19
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