应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Bac-to-bac杆状病毒表达系统
161/2返回列表12下一页
查看: 2474  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

马海云

金虫 (小有名气)

[求助] Bac-to-bac杆状病毒表达系统 已有4人参与

我最近在用这个系统做蛋白表达，提取杆粒测得DNA浓度也在几百纳克每微升，但转染到细胞后，就是没表达，这是怎么回事呢？可能的原因有哪些？请大家帮忙解答下，万分感谢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-12-22 09:35:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李小同

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是怎么提取的BACMID？我们提出来都是几千甚至上万的浓度，然后才做的转染。
赞一下 回复此楼
2楼2014-12-22 12:48:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鱼大喵

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
转染现象明显吗？用的什么细胞啊？
赞一下 回复此楼
3楼2014-12-22 17:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马海云

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鱼大喵 at 2014-12-22 17:02:19
转染现象明显吗？用的什么细胞啊？

我用的Tn 细胞，拿p1来检测的
赞一下 回复此楼
4楼2014-12-25 12:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马海云

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 李小同 at 2014-12-22 12:48:58
你是怎么提取的BACMID？我们提出来都是几千甚至上万的浓度，然后才做的转染。

就是用的英俊的试剂盒提的啊
赞一下 回复此楼
5楼2014-12-25 12:07:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鱼大喵

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

西门吹雪170: 鼓励回帖交流 2014-12-26 20:29:09
引用回帖:
4楼: Originally posted by 马海云 at 2014-12-25 12:06:20
我用的Tn 细胞，拿p1来检测的...

bacmid浓度有点低，我们用的量至少1微克。不过有时P1确实检测不到，到了P2 P3才能检测到。你要不重新用多点染，要不接下去做，看P2 P3的表达情况。
赞一下 回复此楼
6楼2014-12-25 13:38:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马海云

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 鱼大喵 at 2014-12-25 13:38:34
bacmid浓度有点低，我们用的量至少1微克。不过有时P1确实检测不到，到了P2 P3才能检测到。你要不重新用多点染，要不接下去做，看P2 P3的表达情况。...

是的  我就在接着下去 看P2  然后又重新把量提上来做一遍，希望会有好结果吧    对了，这个bacmid你们提取后有没有的检测一下的啊？
赞一下 回复此楼
7楼2014-12-26 10:27:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鱼大喵

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 马海云 at 2014-12-26 10:27:34
是的  我就在接着下去 看P2  然后又重新把量提上来做一遍，希望会有好结果吧    对了，这个bacmid你们提取后有没有的检测一下的啊？...

有啊，用酶标仪检测量和纯度
赞一下 回复此楼
8楼2014-12-26 20:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马海云

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 鱼大喵 at 2014-12-26 20:36:10
有啊，用酶标仪检测量和纯度...

酶标仪测量？怎么弄
赞一下 回复此楼
9楼2014-12-28 08:35:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

喜气洋洋

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

bacmid提取后做一个酶切，0.7%的胶，100v跑跑看，验证一下，有可能提取的不是bacmid呢，我遇到过一次

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
学海无涯懂做舟
10楼2014-12-28 09:12:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 马海云 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 4/200 2026-11-11 12:14 by gRND4NVAZ8VG
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 czAiolzR0IJC 2026-11-10 3/150 2026-11-11 12:05 by gRND4NVAZ8VG
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 3/150 2026-11-11 11:10 by 1Nb0IVlmV6v0
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 10:43 by 1Nb0IVlmV6v0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 10:35 by 1Nb0IVlmV6v0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 10:32 by 1Nb0IVlmV6v0
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 5/250 2026-11-11 10:10 by 1Nb0IVlmV6v0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-11 04:54 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 04:40 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 04:32 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 04:29 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 04:07 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:32 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 5/250 2026-11-11 00:59 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭