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huangrong木虫 (正式写手)
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病毒载体的最大携带量?
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| 想知道病毒载体的最大携带量?如腺病毒或腺相关病毒.另外有什么方法可以提高携带量? |
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gaofenzi206
至尊木虫 (文坛精英)
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 腺病毒基因组E1区，E3区可作为外源基因的插入区。 E1区缺失的腺病毒可克隆约4.7kb的外源DNA， E3区缺失的腺病毒可克隆约8kb的外源DNA。 （腺病毒作为基因治疗载体） 一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体，此类型载体可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应，表达外源基因时间短。 E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体，产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面亦改进许多。 第三代腺病毒载体则缺失了全部的（无病毒载体，gutless vector）或大部分腺病毒基因（微型腺病毒载体，mini Ad），仅可保留ITR和包装信号序列。 第三代腺病毒载体最大可插入35kb的基因，病毒蛋白表达引起的细胞免疫反应进一步减少，载体中引入核基质附着区基因可使得外源基因保持长期表达，并增加了载体的稳定性。这一载体系统需要一个腺病毒突变体作为辅助病毒。 腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒，在自然界分布广泛，至少存在100种以上的血清型。其基因组长约36kb，两端各有一个反向末端重复区（ITR），ITR内侧为病毒包装信号。 基因组上分布着4个早期转录元（E1、E2、E3、E4）承担调节功能，以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。 早期基因E2产物是晚期基因表达的反式因子和复制必须因子， 早期基因E1A、E1B产物还为E2等早期基因表达所必须。 因此，E1区的缺失可造成病毒在复制阶段的流产。 E3为复制非必须区，其缺失则可以大大地扩大插入容量。 [ Last edited by gaofenzi206 on 2008-5-25 at 00:05 ] |
2楼2008-05-24 23:29:40