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huangrong

木虫 (正式写手)

[交流] 病毒载体的最大携带量?

想知道病毒载体的最大携带量?如腺病毒或腺相关病毒.另外有什么方法可以提高携带量?
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gaofenzi206

至尊木虫 (文坛精英)

汪星来的喵教授


腺病毒基因组E1区,E3区可作为外源基因的插入区。
E1区缺失的腺病毒可克隆约4.7kb的外源DNA,
E3区缺失的腺病毒可克隆约8kb的外源DNA。
(腺病毒作为基因治疗载体)


一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,表达外源基因时间短。
E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面亦改进许多。
第三代腺病毒载体则缺失了全部的(无病毒载体,gutless vector)或大部分腺病毒基因(微型腺病毒载体,mini Ad),仅可保留ITR和包装信号序列。
第三代腺病毒载体最大可插入35kb的基因,病毒蛋白表达引起的细胞免疫反应进一步减少,载体中引入核基质附着区基因可使得外源基因保持长期表达,并增加了载体的稳定性。这一载体系统需要一个腺病毒突变体作为辅助病毒。

腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒,在自然界分布广泛,至少存在100种以上的血清型。其基因组长约36kb,两端各有一个反向末端重复区(ITR),ITR内侧为病毒包装信号。
基因组上分布着4个早期转录元(E1、E2、E3、E4)承担调节功能,以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。
早期基因E2产物是晚期基因表达的反式因子和复制必须因子,
早期基因E1A、E1B产物还为E2等早期基因表达所必须。
因此,E1区的缺失可造成病毒在复制阶段的流产。


E3为复制非必须区,其缺失则可以大大地扩大插入容量。

[ Last edited by gaofenzi206 on 2008-5-25 at 00:05 ]
在你有些矫揉造作的外表下藏着一颗骑士般追求理想的心。
2楼2008-05-24 23:29:40
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