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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Kobe君临天下

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 关于two-step PCR 已有3人参与

In this study, we used a two-step PCR protocol as previously described (19). With this approach, tags and adapters were added in a second round of PCR amplification. This method facilitates DNA amplification from complex biological samples (20), increases reproducibility, and recovers higher genetic diversity, avoiding the amplification bias that is introduced by using long fusion primers in one-step PCR amplification。
我是小白一个，这里面的tag 和adapter分别是什么意思啊？还有，最主要的:这个two-step PCR 是一个什么方法，能不能就具体讲一下，因为要向老师汇报这篇文章，但是对这个完全不了解啊，去哪里找找这方面的资料？
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1楼 2014-12-18 11:13:42
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Kobe君临天下

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by guoliwang at 2014-12-19 06:20:17
有一种两步法PCR是将第一步PCR产物做模板，进行第二次PCR。如果你不会上传全文，把链接贴上也行。否则象在玩猜猜猜......

能不能具体说一下呢？这种方法有什么好处吗？文章是老师给的，所以不清楚链接，题目是Impact of Long-Term Diesel Contamination on Soil Microbial Community Structure。
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16楼2014-12-19 08:59:02
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Kobe君临天下: 金币+2, ★有帮助 2014-12-18 14:24:41
在本研究中，我们使用前面提到的两步PCR方法。这种方法，标签和适配器会添加在第二轮PCR扩增时。该方法促进复制的生物样本中的DNA扩增，增加再现性和恢复较高的遗传多态性，避免了此前介绍的用长融合引物的一步PCR扩增产生的扩增偏移。

tag：就是标签的意思，用来分辨你最后PCR的产物。
adapter：适配器，就是接头一样的东西。
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2楼2014-12-18 11:50:39
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
Kobe君临天下: 金币+2, ★有帮助 2014-12-18 14:26:14
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-12-18 11:50:39
在本研究中，我们使用前面提到的两步PCR方法。这种方法，标签和适配器会添加在第二轮PCR扩增时。该方法促进复制的生物样本中的DNA扩增，增加再现性和恢复较高的遗传多态性，避免了此前介绍的用长融合引物的一步PCR扩 ...

http://www.lifetechnologies.com/ ... wo-step-rt-pcr.html
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3楼2014-12-18 11:54:01
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Kobe君临天下

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-12-18 11:50:39
在本研究中，我们使用前面提到的两步PCR方法。这种方法，标签和适配器会添加在第二轮PCR扩增时。该方法促进复制的生物样本中的DNA扩增，增加再现性和恢复较高的遗传多态性，避免了此前介绍的用长融合引物的一步PCR扩 ...

能不能具体介绍一下two-step PCR呢？对这个不了解啊！
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4楼2014-12-18 14:26:02
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