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杨德斌

银虫 (小有名气)

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专业: 药剂学

[交流] EDC，NHS水中酰化反应的一些问题，不要求您把每一个问题都能回复地很清楚，重在交流。

最近在水中做酰化反应，有一些问题一直没搞清楚，请教各位。
1. 羧酸钠在活化之前要不要加酸游离？
2. 有报道称，EDC最佳活化pH范围在4~6，如何调节？如果用MES缓冲液的话，其离子强度一般选用多少 mM 比较合适？
3. 非常重要的一点，EDC、NHS与羧基的比例，加入顺序，活化温度，活化时间？
4. 因为我的伯氨基是以盐酸盐的形式存在的，是不是在加入之前应该用碳酸钠或者碳酸钾等碱进行游离使其成-NH2形式？
5. 在氨基羧基溶液混合之后，其pH会出现一定的变化，请问最终反应体系的pH是多少合适？
有人说，活化在弱酸条件下比较好，这个没有异议，但是酰胺键偶合在碱性条件下比较好，因为这样活化酯键才能更好断掉，然后与-NH2偶联。如果这样的话，是不是应该再加入PBS缓冲液，使其pH变成弱碱性，pH调到几比较合适？但也有人认为，自始至终应都在弱酸条件下反应，所以有的人一直在pH 6条件下做反应。据说，pH是影响反应产率的关键因素，尤其是小分子与大分子之间的酰胺反应或者大分子之间的酰胺反应，牵涉到一个接枝率的问题。如何更好地提高反应效率，求大神指导。

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